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誘導動物細胞融合的方法

瀏覽次數(shù):7912 發(fā)布日期:2009-1-6  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
 
在體外培養(yǎng)條件下,動物細胞會自發(fā)融合,但是頻率極低。因此,一般都需要添加具有誘導細胞融合效應的生物或化學藥劑,或者采用電融合技術,人為地促進細胞融合。
 
病毒誘導融合 
 
病毒是最早采用的融合劑。常用于誘導動物細胞融合的病毒有仙臺病毒、新城雞瘟病毒、皰疹病毒等,其中仙臺病毒最常用。用作融合劑的病毒必須事先用紫外線或β-丙內酯滅活,使病毒的感染活性喪失而保留病毒的融合活性。
用滅活的仙臺病毒誘導細胞融合的
優(yōu)點:融合率較高,對各種動物細胞都適宜,且仙臺病毒能在雞胚中大量繁殖,容易培養(yǎng);
缺點:仙臺病毒不穩(wěn)定,在保存過程中融合活性會降低,并且制備過程比較煩瑣。此外,病毒引進細胞后,可能會對細胞的生命活動產(chǎn)生干擾。
 
聚乙二醇PEG誘導融合 
 
聚乙二醇PEG具有強烈的吸水性以及凝聚和沉淀蛋白質的作用,能夠有效地促進植物原生質體和動物細胞的融合。在不同種類的動物細胞混合液中加入聚乙二醇,就會發(fā)生細胞凝集作用;在稀釋和除去聚乙二醇的過程中,就會發(fā)生細胞融合。聚乙二醇誘導細胞融合的機理,目前還不太清楚。聚乙二醇是化學試劑,使用起來很方便,誘導細胞融合的頻率比較高,但是它有一定毒性,對有些細胞(如卵細胞)不適用
 
細胞融合法 
20世紀80年代建立起來的細胞融合技術,是將兩種細胞的混合液置于低壓交流電場中,使細胞聚集成串珠狀,然后施加高壓電脈沖,以促使細胞融合。緊密排列的細胞,在相互接觸的細胞膜之間會出現(xiàn)無蛋白顆粒的脂質區(qū),當受到電擊時,這個區(qū)域就會被擊穿,產(chǎn)生脂雙層膜孔,導致細胞之間的細胞質連通,進而發(fā)生細胞融合。細胞融合技術有許多優(yōu)點,如導細胞融合的頻率高,對細胞無毒害作用,操作簡便,可重復性好。
發(fā)布者:香港友誠生物科技有限公司
聯(lián)系電話:010-51297139、4009988151
E-mail:info@fhsci.com

標簽: 細胞融合儀
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