等密度離心法去除紅細胞和死細胞                                                         

器材和試劑： 
所有直接接觸細胞的用品和試劑必須無菌。
1. 標注體積刻度的試管（圓錐形底）；
2. 巴斯德吸管（短型和長型）；
3. 10ml刻度吸管和洗耳球或移液裝置；
4. 臺式離心機；
5. 淋巴細胞分離液或類似試劑；
6. 培養(yǎng)基；

實驗方法：
1. 重懸細胞使之達到5×10⁶—10⁷個/ml的高濃度。在一個離心管中加入10ml淋巴細胞分離液，用巴斯德吸管或10ml移液管小心將5ml的原代細胞懸液加于淋巴細胞分離液面上。將容器傾斜一個角度，沿容器壁慢慢地將細胞懸液滴下，而不是直接滴到淋巴細胞分離液表面。目的是在兩種液體之間得到一個清晰的界面，以便更好地分離；
2. 不制動1000r/min離心試管20min（注：離心時緩慢地減速可使淋巴細胞分離液與培養(yǎng)基之間形成清晰的界面）；
3. 從離心機中小心地取出容器，觀察兩液面之間的界面，可見一乳狀黃色細胞帶。紅細胞和死細胞形成沉淀沉于容器底部；
4. 用一個巴斯德吸管吸出界面可見的細胞層，轉(zhuǎn)入一個離心管；
5. 向收集的細胞中加入新鮮培養(yǎng)基并混勻。1000r/min離心5min，重復(fù)兩次，洗去細胞表面的淋巴細胞分離液；
6. 將細胞重懸于已知體積的培養(yǎng)基中，進行細胞計數(shù)和活力測定；