五洲鼎創(chuàng)QM100高通量組織研磨儀在酵母細胞低溫破碎中的使用說明

條形酵母是將酵母通過小孔注入到裝有液體氮的氣罐中壓縮制成的。將有1mm的篩子扣入到裝有10-20 ml球狀酵母的50ml破碎罐的頂部，經(jīng)過離心破碎變成了2L的條狀物。壓力是由人工用60ml的自由活塞注射器注入罐內(nèi)，條狀可以在-80C°下被保存。

將不銹鋼破碎罐、破碎球和裝有條狀酵母的器皿放入到用聚苯乙烯盒子盛放液體氮中，當(dāng)預(yù)冷凍過程結(jié)束后，原來沸騰的液體氮恢復(fù)平靜

將破碎罐從池中取出，并要將破碎罐沾有的液體全部清理干凈，以避免在破碎過程中發(fā)生爆炸。破碎罐、破碎球和器皿最好用有把手的煤氣鉗或坩鍋鉗拿取，而且通常要帶經(jīng)過冷凍的手套。

將破碎球和條狀酵母移入破碎罐中。罐中裝有一半的條狀酵母，易碎的條狀酵母被破碎球預(yù)冷凍的抹刀破碎，酵母的數(shù)量不要超過破碎罐體積的1/3，否則破碎的效率就會變得很底下。

然后將破碎罐蓋緊，在安裝在破碎機之前將破碎罐再次放入到液體氮中幾秒鐘，然后將破碎罐夾緊。

破碎次數(shù)為5次，每次3分鐘，功率為30hz。在每次破碎后都要將破碎罐取下，放入到裝有液體氮的水池中。當(dāng)水池沸騰后，破碎可以繼續(xù)進行。所需樣本最后可以得到，而且也通過顯微鏡可以看到有價值的破碎過程。

經(jīng)過15分鐘的破碎后，我們發(fā)現(xiàn)90%的酵母已經(jīng)達到破碎效果。

剩余的殘渣被回收到50ml的器皿中以備后用或貯存。然后用一種具有永磁性的磁鐵把破碎球從殘渣中吸出回收。

破碎罐和破碎球可以用溫的乙醇清洗，放到干燥處貯存。

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