采用UPC2-MS/MS對華法林與普萘洛爾及其相關(guān)羥基代謝物進行對映體分離
目的
闡釋合相色譜在分離具有手性中心的化合物時的分析性能。添加的三種含有手性中心的羥基代謝物（結(jié)構(gòu)類似物）增加了分離的復雜性。
背景
許多候選藥物及其代謝物都含有一個或多個手性中心。識別和監(jiān)測可能存在的各種對映體是藥物開發(fā)過程中至關(guān)重要的步驟。超臨界流體色譜（SFC）是一種廣為人知的分離結(jié)構(gòu)相似化合物（包括結(jié)構(gòu)類似物和對映體）的高效技術(shù)。此外，SFC還具有許多優(yōu)勢，例如分析效率高、分離速度快，以及使用的溶劑與MS兼容等。
解決方案
在本技術(shù)簡報中，我們展示了利用UPC2-MS/MS華法林及其三種羥基代謝物（圖1）和普萘洛爾及其三種羥基代謝物（圖2）進行對映體分離和檢測的簡易性。
超高效合相色譜（UltraPerformance ConvergenceChromatographyTM，UPC2® ）與MS檢測聯(lián)用有利于母
體化合物和三種羥基代謝物的對映體分離。
研究人員利用配備ACQUITY UPC2 TrefoilTM CEL1，2.5 μm，3.0×100 mm色譜柱的ACQUITY UPC2®系
統(tǒng)，并以甲酸銨改性的甲醇作為共溶劑，成功完成了華法林的方法優(yōu)化。通過使用線性梯度并將柱溫保持在10 ℃，六種構(gòu)型的羥基華法林在4.5 min內(nèi)成功實現(xiàn)分離（圖3）。研究人員利用ACQUITY UPC2 Trefoil CEL1，2.5 μm，
3.0×150 mm色譜柱，以甲酸銨改性的甲醇作為共溶劑對普萘洛爾進行了分離。在本例中，通過使用線性梯度并將柱溫保持在30 ℃，六種構(gòu)型的羥基普萘洛爾在14 min內(nèi)成功實現(xiàn)分離。
總結(jié)
UPC2與MS聯(lián)用有利于母體化合物和三種羥基代謝物的對映體分離。華法林、6-羥基華法林、7-羥基華法林和8-羥基華法林對映體在5 min內(nèi)成功分離，普萘洛爾、4-羥基普萘洛爾、5-羥基普萘洛爾和7-羥基普萘洛爾在15 min內(nèi)成功
分離。識別化合物與代謝物的不同手性構(gòu)型是藥物開發(fā)過程中至關(guān)重要的一步，借助超高效合相色譜可輕松實現(xiàn)。
