C2C12細胞培養(yǎng)操作指南
| 名稱 | C2C12 （小鼠成肌細胞） |
| 別稱 | C2c12；C2-C12；C12 |
| 種屬 | 小鼠 |
| 生長特性 | 貼壁細胞 |
| 細胞形態(tài) | 成肌細胞樣 |
| 傳代融合度 | 70% |
| 凍存液 | 55% 基礎培養(yǎng)基 + 40% FBS + 5% DMSO |
| 推薦傳代比例 | 1:3 - 1:4 |
| 推薦換液頻率 | 2-3次/周 |
細胞簡介
圖片來源：ATCC
推薦培養(yǎng)體系：
DMEM 【VivaCell C3113】＋ 10% FBS 【VivaCell C04002】＋ 1% P/S 【VivaCell C3420】
細胞培養(yǎng)步驟
待細胞融合度約70%時即可進行傳代。
以T25培養(yǎng)瓶為例：
-
吸出原培養(yǎng)液；加入2ml左右PBS【VivaCell C3580】，輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細胞，吸出PBS丟棄；
-
加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液【VivaCell C3530】，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細胞后放入培養(yǎng)箱消化約3 min，顯微鏡下觀察多半呈流沙狀，終止消化；（全程不要拍打培養(yǎng)瓶）
-
離心，300g、3min，離心完吸出上清丟棄；
-
加入新鮮培養(yǎng)基，將細胞吹到成單個，經(jīng)計數(shù)，均勻接種到新培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)基至5ml，放培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
細胞誘導分化
由于C2C12細胞分化很快，對于研究對理解肌肉細胞發(fā)育和修復（再生）是非常重要的。低濃度的馬血清能夠有效刺激C2C12成肌細胞向成熟細胞分化。
我們在這里也簡單介紹下誘導分化的相關知識：
01
誘導體系：
DMEM 【VivaCell C3113】＋ 馬血清 【VivaCell C2510】（常見比例為2%）＋ 1% P/S 【VivaCell C3420】
02
簡述細胞誘導步驟：
待細胞生長至融合度約過80%時。
-
用PBS【VivaCell C3580】潤洗細胞后吸出PBS丟棄；
-
換誘導分化培養(yǎng)基，后續(xù)每24h換液一次，在顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長狀況。
03
誘導時刻關鍵步驟：
-
誘導前提：低代次，細胞狀態(tài)很好的C2C12細胞
-
融合時間：在其融合率剛過80%，換含有馬血清（一般是2%比例）完全培養(yǎng)液。之后需要每天進行換液
-
誘導時間：正常7天內可成功
-
提示：誘導的期間會有不少的死亡細胞，也有又成肌細胞的緩慢生長，是正常的
-
成功的標志：最后可以看見肌管，表現(xiàn)為厚的管狀結構，有時為多核
圖片來源：網(wǎng)絡，侵刪
歡迎關注公眾號留言咨詢，給您最合適的解決方案~
了解詳細信息可戳原文，轉載請標明出處。
BI 中國市場部：上海逍鵬生物科技有限公司
詳情點擊：閱讀原文
