GLP-1類藥物及其純化工藝介紹
胰高血糖素樣肽（Glucagon-Like Peptide，GLP-1）是由腸道分泌的一種內(nèi)源性肽類激素，促進胰島素分泌并抑制胰高血糖素的分泌。胰高血糖素樣肽-1受體激動劑（Glucagon-Like Peptide-1 Receptor Agonist，GLP-1RA ）是GLP-1經(jīng)結(jié)構(gòu)修飾所得的GLP-1類似物，提高體內(nèi)活性GLP-1水平，降低血糖。
上游制備工藝GLP-1類藥物是一種多肽類藥物，上游制備工藝主要分為化學(xué)合成法與生物發(fā)酵法。生物發(fā)酵法以大腸桿菌、酵母及CHO細胞表達為主，通常將多肽與標(biāo)簽融合表達，安全性高、成本低、生產(chǎn)規(guī)模大，但該途徑獲得的多肽樣品成分復(fù)雜，對下游層析工藝提出更高的要求。
下游純化工藝不同生物發(fā)酵法的下游層析工藝也不盡相同，主要體現(xiàn)在捕獲階段。
GLP-1RA 多肽簡單的GLP-1RA 多肽純化可先采用陰離子交換層析粗純，去除氨基酸數(shù)目缺失雜質(zhì)以及大量HCP、HCD后再經(jīng)反相層析精純，去除異構(gòu)體、降解肽與其他副產(chǎn)物。
Fc 融合蛋白 GLP-1RA 多肽這類GLP-1RA 多肽具有部分抗體的性質(zhì)，分子量大、易形成聚體，可采用Protein A或Protein G親和填料捕獲FC融合蛋白，再經(jīng)離子與疏水進行進一步純化。
His 標(biāo)簽融合蛋白 GLP-1RA 多肽Ni柱可捕獲His 標(biāo)簽融合蛋白，如需加入尿素、鹽酸胍或還原劑溶解包涵體時，推薦TED絡(luò)合的鎳金屬鰲合填料。后續(xù)再利用離子、疏水或反相填料精純，提高活性多肽純度。
HSA 融合蛋白 GLP-1RA 多肽人血清白蛋白修飾后的GLP-1RA 多肽分子量增大，可延長半衰期，粗純階段使用藍膠（博格隆Blue Bestarose FF）對白蛋白融合蛋白進行捕獲。
總結(jié)GLP-1類藥物的生物活性易受純度的影響，根據(jù)不同的開發(fā)策略，需要采用不同的純化路線，因此開發(fā)有效的純化方法對于提高產(chǎn)品質(zhì)量至關(guān)重要。
