Pribolab“雙柱“ 凈化技術(shù)方案用于食品中的黃曲霉毒素檢測
我們吃的美食，比如麻辣燙、火鍋、麻辣小龍蝦當中，美味的關(guān)鍵是辣椒、花椒、麻椒、香辛料等調(diào)味料。這些調(diào)料給我們帶來舌尖上的盛宴的同時，安全問題也成為關(guān)鍵。其中黃曲霉毒素是這些調(diào)料當中最常檢測的毒素。
Pribolab針對辣椒、花椒、麻椒、香辛料等復雜基質(zhì)，根據(jù)【GB 5009.22-2016 食品安全國家標準 食品中黃曲霉毒素B族和G族的測定】，對辣椒、花椒、香辛料等基質(zhì)做了黃曲霉毒素檢測的方法驗證，驗證過程如下：
檢測方法 ：
第一法（同位素稀釋液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法）
實驗步驟：
黃曲霉毒素混合標準工作液：AFB1：AFB2：AFG1：AFG2為1：0.25：1：0.25 ug/mL
黃曲霉毒素混合同位素內(nèi)標工作液：13C17-AFB1：13C17-AFB2：13C17-AFG1：13C17-AFG2為0.5 ug/mL
稱取 5g試樣+50uL混合標準工作液+40uL混合同位素內(nèi)標工作液+84%乙腈 20mL→振蕩30min→離心 10min（離心速度 4000r/min）→取上清液過PriboFast®MFC226固相凈化柱→取4mL凈化液+46mL吐溫PBS稀釋→將全部稀釋液通過PriboFast®AFT免疫親和柱→先用10mLPBS淋洗，再用10mL水淋洗免疫親和柱→棄去淋洗液，使空氣進入柱子，將水擠出柱子→用2mL甲醇洗脫，收集洗脫液于試管中→50℃下氮氣吹至近干，用流動相復溶→微孔濾膜（0.22μm）過濾，取濾液上機。
驗證結(jié)果
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AFB1（%） |
AFB2（%） |
AFG1（%） |
AFG2（%） |
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辣椒加標-1 |
104.0 |
101.1 |
96.3 |
96.0 |
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辣椒加標-2 |
101.5 |
97.6 |
99.7 |
98.6 |
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花椒加標-1 |
97.3 |
95.8 |
102.6 |
97.9 |
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花椒加標-2 |
98.4 |
99.2 |
104.1 |
100.2 |
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鹵粉加標-1 |
102.9 |
96.8 |
98.0 |
95.1 |
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鹵粉加標-2 |
99.6 |
97.4 |
96.1 |
97.8 |
辣椒樣品液質(zhì)內(nèi)標和外標譜圖：
黃曲霉毒素B1
黃曲霉毒素B2
黃曲霉毒素G1
黃曲霉毒素G2
第二法（高效液相色譜法）
實驗步驟：
黃曲霉毒素混合標準工作液：AFB1：AFB2：AFG1：AFG2為1：0.25：1：0.25 ug/mL
稱取 5g試樣+50uL混合標準工作液+84%乙腈 20mL→振蕩30min→離心 10min（離心速度 4000r/min）→取上清液過PriboFast®MFC226固相凈化柱→取4mL凈化液+46mL吐溫PBS稀釋→將全部稀釋液通過PriboFast®AFT免疫親和柱→先用10mLPBS淋洗，再用10mL水淋洗免疫親和柱→棄去淋洗液，使空氣進入柱子，將水擠出柱子→用2mL甲醇洗脫，收集洗脫液于試管中→50℃下氮氣吹至近干，用流動相復溶→微孔濾膜（0.22μm）過濾，取濾液上機。
驗證結(jié)果：
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AFB1（%） |
AFB2（%） |
AFG1（%） |
AFG2（%） |
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辣椒加標-1 |
90.6 |
91.1 |
86.3 |
92.1 |
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辣椒加標-2 |
93.5 |
87.6 |
83.9 |
88.6 |
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花椒加標-1 |
92.8 |
85.0 |
92.0 |
87.9 |
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花椒加標-2 |
95.4 |
89.2 |
94.3 |
90.2 |
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鹵粉加標-1 |
91.0 |
86.1 |
88.5 |
85.1 |
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鹵粉加標-2 |
88.9 |
87.4 |
86.0 |
87.8 |
鹵粉標準品和樣品加標液相色譜圖：
