CD47蛋白的作用機制及在癌癥免疫治療中的應用案例分享
增強CD47檢查點免疫治療：高通量發(fā)現(xiàn)增強巨噬細胞吞噬作用
CD47是一種廣泛表達的跨膜蛋白，屬于免疫球蛋白超家族，在多種細胞類型（包括腫瘤細胞、紅細胞和免疫細胞）表面存在。其在癌癥生物學中的核心意義是作為“不要吃我”（Don't Eat Me）信號受體。
CD47是一種廣泛表達的跨膜蛋白，屬于免疫球蛋白超家族，在多種細胞類型（包括腫瘤細胞、紅細胞和免疫細胞）表面存在。其在癌癥生物學中的核心意義是作為“不要吃我”（Don't Eat Me）信號受體。
作用機制：CD47與巨噬細胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白α（SIRPα）結(jié)合，觸發(fā)抑制性信號通路，阻止巨噬細胞對靶細胞的吞噬。這類似于一個“檢查點”，幫助健康細胞避免被誤噬，但腫瘤細胞高表達CD47以逃避免疫清除（REFERENCES中引用Feng et al., 2019和Liu et al., 2023）。
在癌癥免疫治療中的意義：CD47阻斷是新興的免疫治療策略。通過抗體（如BioXcell的Anti-CD47）阻斷CD47-SIRPα相互作用，可以“解除剎車”，增強巨噬細胞介導的腫瘤細胞吞噬。
文獻案例：
| 文章主題 | A protocol for high-throughput screening for small chemicals promoting macrophagemediated tumor cell phagocytosis in mice |
| 目標 | 文章的實驗思路框架圍繞“高通量篩選促進巨噬細胞介導的腫瘤細胞吞噬的小分子”協(xié)議展開。包括裝備腫瘤細胞、制備巨噬細胞、優(yōu)化共培養(yǎng)條件、執(zhí)行高通量篩選和數(shù)據(jù)分析 |
| 實驗模型 | 腫瘤細胞：工程化表達eGFP-Luc的人類癌細胞系（如SW480） 巨噬細胞：原代小鼠骨髓來源巨噬細胞（BMDMs），作為吞噬效應細胞。 |
實驗workflow
| 階段1 | 裝備腫瘤細胞表達eGFP和熒光素酶，使吞噬后存活細胞可通過發(fā)光信號量化 |
| 階段2 | 從小鼠骨髓制備原代巨噬細胞，作為吞噬效應細胞用于共培養(yǎng) |
| 階段3 | 優(yōu)化巨噬細胞-腫瘤細胞比例和抗體濃度，使基礎吞噬率在40-60%，便于篩選 |
| 階段4 | 通過D-luciferin發(fā)光信號量化吞噬率，替代傳統(tǒng)流式或顯微鏡方法 |
| 階段5 | 在96孔板中測試小分子化合物，識別吞噬增強劑或抑制劑 |
| 階段6 | 驗證BMDM純度（F4/80標記）和eGFP-Luc細胞感染效率 |
| 階段7 | 計算吞噬率和藥物敏感性分數(shù)，識別有效化合物 |
| 抗體名稱 | 來源公司 | 標識符 (Identifier) | 目的 | 用途 |
| Anti-CD47 antibody | Bio X Cell | BE0019-1 | 阻斷吞噬檢查點（CD47信號通路），解除腫瘤細胞對巨噬細胞的“不要吃我”抑制，從而增強吞噬活性。 | 在共培養(yǎng)優(yōu)化和HTS中添加，用于誘導基礎吞噬（如4000 ng/mL濃度），便于篩選小分子增強劑。 |
BioXcell的Anti-CD47抗體（BE0019-1）直接靶向CD47，在共培養(yǎng)系統(tǒng)中用于誘導吞噬。 但是文章中說明CD47阻斷單用常不足以有效抑制腫瘤，因此文章旨在通過HTS尋找小分子增強劑，提升抗體療效。
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