小鼠細(xì)胞特異性耗竭抗體在細(xì)胞耗竭實驗中的應(yīng)用及案例分享
Bio X Cell 提供一系列針對小鼠細(xì)胞表面蛋白的單克隆抗體，用于體內(nèi)細(xì)胞特異性清除Depletion研究。體內(nèi)細(xì)胞特異性清除Depletion實驗被廣泛用于確定特定細(xì)胞類型在各種免疫過程和疾病中的作用。
這些抗體可用于體內(nèi)研究，其中注射的耗盡抗體旨在清除Depletion特定細(xì)胞類型。這些類型的實驗可用于擴展和確認(rèn)使用基因敲除小鼠品系獲得的結(jié)果，或提供有關(guān)特定細(xì)胞類型的直接生物學(xué)相關(guān)性的信息。
這些抗體通過多種機制介導(dǎo)細(xì)胞清除Depletion，包括抗體依賴性細(xì)胞毒性 (ADCC)、補體依賴性細(xì)胞毒性 (CDC) 和抗體依賴性細(xì)胞吞噬作用 (ADCP)。
有關(guān)體內(nèi)注射這些抗體的劑量和給藥動力學(xué)的信息，Bio X Cell為每種清除Depletion抗體編制了一份最新的參考文獻列表，以方便為您找到適合實驗系統(tǒng)和目標(biāo)的最佳方案。
Depletion打到動物體內(nèi)有，有四個方式導(dǎo)致靶細(xì)胞的死亡
1、Complement-dependent cytotoxicity (CDC)
補體依賴的細(xì)胞毒性作用
2、antibody-dependent cellular cytotoxicity (ADCC)
抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用
3、antibody-dependent phagocytosis (ADCP).
抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞吞噬作用
4、complement-dependent cellular phagocytosis (CDCP)
補體依賴的細(xì)胞毒性作用
二 、文獻實驗案例
1、實驗思路總結(jié)
| 文章主題 | Orchestrating intratumoral DC-T cell immunity for enhanced tumor control via radiotherapy-activated TLR7/8 prodrugs in mice |
| 目標(biāo) | 揭示腫瘤微環(huán)境（TME）中樹突細(xì)胞（DC）與T細(xì)胞相互作用的動態(tài)調(diào)控機制 放療激活的前藥O-IMDQ能否在腫瘤局部特異性釋放活性分子，激活DC并增強CD8⁺T細(xì)胞應(yīng)答 優(yōu)化放療劑量方案（如4-6 Gy×3）能否協(xié)同增強原發(fā)灶控制并誘導(dǎo)遠端效應(yīng) |
| 實驗?zāi)Ｐ?/span> | 體外&體內(nèi) |
2. 實驗方法學(xué)關(guān)聯(lián)表
| 方法學(xué)名稱 | 具體操作 | 科學(xué)目的 | 與其他方法關(guān)聯(lián) |
| 前藥合成 | N-氧化反應(yīng)修飾IMDQ生成O-IMDQ | 實現(xiàn)輻射觸發(fā)激活 | ↑ 分子對接驗證結(jié)合位點改變↓ 體內(nèi)外激活實驗驗證功能 |
| 分子對接 | 模擬TLR8-IMDQ/O-IMDQ復(fù)合物結(jié)構(gòu) | 闡明氧原子阻斷機制 | → 指導(dǎo)前藥設(shè)計↓ 細(xì)胞實驗驗證功能喪失/恢復(fù) |
| 報告基因系統(tǒng) | RAW-blue/hTLR8細(xì)胞檢測TLR活性 | 定量前藥激活效率 | ↑ 前藥設(shè)計驗證→ BMDC實驗關(guān)聯(lián)功能恢復(fù) |
| BMDC實驗 | 流式檢測CD80/CD86/H2Kb-SIINFEKL | 評估DC成熟與抗原呈遞 | ↑ RNA-seq揭示IFN通路激活→ 體內(nèi)T細(xì)胞應(yīng)答驗證 |
| 多腫瘤模型 | MC38/B16F10/4T1雙側(cè)/轉(zhuǎn)移模型 | 評估局部與全身療效 | ↑ 細(xì)胞耗竭實驗確定關(guān)鍵效應(yīng)細(xì)胞→ 放療劑量優(yōu)化實驗 |
| RNA-seq | 分選瘤內(nèi)DC與CD8+T細(xì)胞測序 | 解析I型IFN通路機制 | ↓ IFNAR阻斷實驗驗證功能→ 流式驗證T細(xì)胞擴增與活化 |
3. 多腫瘤模型中，細(xì)胞耗竭實驗確定關(guān)鍵效應(yīng)細(xì)胞的抗體使用清單
| 抗體靶標(biāo) | 克隆號 | 貨號 | 用途 |
| CSF1R | AFS98 | BE0213 | 巨噬細(xì)胞耗竭 |
| CD4 | GK1.5 | BE0003-1 | CD4+T細(xì)胞耗竭 |
| CD8 | 53-5.8 | BE0004-1 | CD8+T細(xì)胞耗竭 |
| NK1.1 | PK136 | BE0036 | NK細(xì)胞耗竭 |
| IFNγ | XMG1.2 | BE0055 | 中和IFNγ活性 |
靶標(biāo)生物學(xué)意義
| 靶標(biāo) | 生物學(xué)意義 | 實驗揭示的功能 |
| CSF1R | 巨噬細(xì)胞存活關(guān)鍵受體 | 耗竭后療效不變 → 排除巨噬細(xì)胞核心作用 |
| CD4 | T輔助細(xì)胞標(biāo)志 | 耗竭不影響療效 → 非主要效應(yīng)細(xì)胞 |
| CD8 | 細(xì)胞毒性T細(xì)胞標(biāo)志 | 耗竭完全取消療效 → 核心效應(yīng)細(xì)胞 |
| NK1.1 | NK細(xì)胞標(biāo)志 | 耗竭不影響療效 → 非必要效應(yīng)細(xì)胞 |
| IFNγ | Th1型免疫應(yīng)答核心因子 | 中和后療效喪失 → 必需細(xì)胞因子 |
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