鉛是一類典型的神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育毒物，可干擾神經(jīng)細胞的成熟過程，并影響神經(jīng)遞質(zhì)的合成與釋放，最終導致學習與記憶能力的下降[1]。海爾福口服液是由我院研制的保健類制劑，前期試驗證實它能夠提升鉛中毒小鼠的血紅蛋白含量，并降低ALT活性[2]。為了進一步明確其對記憶障礙的作用機制，我們在復雜迷宮實驗的基礎(chǔ)上，采用Y型水迷宮測定小鼠的逃避潛伏期和平均達標率，以驗證療效的可靠性。

有文獻報道，血鉛水平與血鋅水平呈負相關(guān)關(guān)系，缺鋅狀態(tài)可能會增加機體對鉛的吸收[3]。因此，本研究還加入了鋅干預，旨在探討鋅與海爾�？诜�液在改善鉛致小鼠記憶損害中的協(xié)同或相互作用。

1.1 實驗動物
昆明種健康雄性小鼠60只，日齡約35天，平均體重20 g。由右江民族醫(yī)學院實驗動物中心提供，均為合格級。

1.2 試劑

• 醋酸鉛：國產(chǎn)分析純；

• 海爾�？诜�液：由銀花、茯苓、甘草等中藥材提取，經(jīng)水煎、乙醇沉淀等工藝制成；

• 葡萄糖酸鋅口服液：哈藥集團三精制藥有限公司生產(chǎn)，批號05040331。

1.3 Y型水迷宮實驗方法
Y型水迷宮裝置由一條長臂與兩條短臂組成：長臂40 cm×15 cm，短臂30 cm×15 cm，高度20 cm。左側(cè)短臂設(shè)置逃生平臺，右側(cè)短臂封閉作為暗道。水深10 cm，溫度維持在（28±0.5）℃。實驗時將小鼠從長臂端輕輕放入，若其在10 s內(nèi)游至平臺即記為正確。小鼠到達平臺休息15 s后重復訓練。每只動物每天訓練10次，共5天。以平均逃避潛伏期和正確反應(yīng)率作為記憶能力指標[4]，若潛伏期超過10 s，則按10 s計。

1.4 染毒與處理方法
小鼠隨機分為5組：鋅治療組、鋅+海爾福治療組、海爾福治療組、單純鉛染毒組、陰性對照組。

• 除對照組外，其余各組均以2 g/L醋酸鉛溶液按0.007 ml/g體重劑量進行腹腔注射，每日一次，連續(xù)35天；

• 對照組注射等體積生理鹽水；

• 染毒14天后開始干預：

  • 鋅治療組：灌胃葡萄糖酸鋅（0.02 mg/只/天）；

  • 海爾福治療組：灌胃海爾�？诜�液（0.1 ml/只，稀釋1倍）；

  • 聯(lián)合組：灌胃鋅與海爾�；旌弦�，劑量同單用組；

  • 其余組給予等體積蒸餾水。

1.5 統(tǒng)計學分析
采用SPSS 10.0軟件進行單因素方差分析。

2.1 逃避潛伏期
單純鉛染毒組的潛伏期顯著延長，與其余組差異有統(tǒng)計學意義（p<0.01或p<0.05）。單用鋅或海爾福的組別均表現(xiàn)出較短的潛伏期，而鋅+海爾福組的效果反而弱于單用組（p<0.05）。隨訓練天數(shù)增加，各組潛伏期均呈縮短趨勢（p<0.01）。

2.2 平均逃避達標率
鋅+海爾福組與單純鉛染毒組的平均達標率較低，而鋅治療組與單純鉛染毒組相比差異顯著（p<0.05）�？傮w趨勢顯示，從第1天到第5天，各組達標率逐漸上升。

Y型水迷宮實驗顯示，單用鋅或海爾�？诜�液均能明顯改善鉛中毒小鼠的記憶損害，表現(xiàn)為潛伏期縮短、達標率升高。鋅的保護作用可能與其誘導金屬硫蛋白（MT）結(jié)合鉛，從而減輕毒性，以及拮抗鉛對ALAD抑制作用有關(guān)[5]。海爾福口服液中含有茯苓等抗氧化成分，可對抗鉛引起的腦組織脂質(zhì)過氧化，因而具有神經(jīng)保護作用[6]。

值得注意的是，鋅與海爾福聯(lián)合應(yīng)用的效果不及單用，提示兩者之間可能存在拮抗現(xiàn)象。具體機制尚需進一步研究。