文章來源公眾號：大分子研發(fā)筆記               作者:書魚

除了上一篇簡單介紹的實體瘤TCE中CD3活性的考量，還有非常多的因素影響TCE在實體瘤中的藥效（如下圖）[1]。



而相應(yīng)的應(yīng)對措施和開發(fā)方向有：

01—加入共刺激信號
T細胞激活并行使功能過程，教科書給出了需要至少兩個信號，甚至三個信號：第一信號（TCE/CD3 complex signal）；第二信號（co-stimulation receptors signal）；第三信號（cytokines-receptor signal）。

第一信號可以誘導(dǎo)T細胞初步激活，但不足以令其實現(xiàn)完整的免疫應(yīng)答。長時間低強度的第一信號的刺激而缺乏第二信號會讓T細胞進入失能狀態(tài)。

第二信號又叫共刺激信號，APC表面的共刺激分子（如CD80/CD86）與T細胞表面的共刺激受體（如CD28）結(jié)合，在第一信號的基礎(chǔ)上，誘導(dǎo)T細胞進一步活化和增殖。

第三信號（分化誘導(dǎo)信號）：根據(jù)抗原類型的不同，APC分泌的細胞因子與T細胞上的受體結(jié)合，誘導(dǎo)T細胞向特定類型的效應(yīng)T細胞分化，如下圖[2]。

那為什么目前大多數(shù)TCE，包括已經(jīng)獲批上市的TCE都只提供第一信號，依然能夠起效呢？
首先，TCE分子的CD3親和力相對于天然TCR識別pMHC的親和力要高不少，這使得免疫突觸更加穩(wěn)定，下游激活信號更加強烈。

其次，大多數(shù)取得成功的TCE均在血液瘤領(lǐng)域，而實體瘤中TCE能夠利用的T細胞的數(shù)量和質(zhì)量完全不可比。

最后，天然狀態(tài)下也并不是完全不提供第二信號，比如多發(fā)性骨髓瘤細胞表達CD58能夠與T細胞上的CD2結(jié)合，一定程度上也提供第二信號。

業(yè)界投入較大的共刺激分子包括CD28，41BB，以及去年流行起來的CD58-CD2通路。2021 年起，賽諾菲和再生元開始押注CD28做了一系列分子。由于安全性問題沒有治療窗口，這一次的嘗試沒有成功，甚至讓我本人對CD28有了不好的第一印象。沉寂了一段時間的CD28，如今Zymeworks提出CD3-CD28 強制 cis-binding 的設(shè)計，希望能取得進展。國內(nèi)其他布局的藥企還包括信達、惠和等。而以羅氏為代表的藥企選擇了41BB作為共刺激信號，諾華、Evolove immune、齊魯?shù)人幤髣t率先布局了CD2。

CD2共刺激信號已經(jīng)有非常多的資料介紹了，不再贅述，基于我的一些CD2項目經(jīng)歷介紹一點個人體會，經(jīng)驗有限僅供參考。

CD2共刺激相比于CD28和41BB主要差異化的點在于：
a. Tumor infiltrate T cell中表達更高更廣泛（如下圖），2025AACR 的一些poster在幾種不同腫瘤中驗證了這一觀點；

b. 某些腫瘤細胞通過下調(diào)CD58逃逸免疫系統(tǒng)殺傷，諾華開發(fā)了PIT565 (CD3/CD2/CD19)，已經(jīng)于2022年進入臨床一期，基于他們的發(fā)現(xiàn)：淋巴瘤細胞上 CD58 表達的下調(diào)或者丟失與接受 CAR-T 療法治療的患者的耐藥性和復(fù)發(fā)有關(guān)（如下圖）[3-4].

但是CD58蛋白還具有兩面性，有報道稱，腫瘤細胞上高表達的CD58促進liver cancer細胞增殖（AKT pathway），colon cancer細胞自我更新（Wnt pathway），與預(yù)后差相關(guān)（如下圖）

在這些腫瘤中，腫瘤細胞CD58高表達，也許CD58-CD2共刺激并不是主要矛盾（比如腫瘤微環(huán)境根本沒有浸潤T細胞， 比如相比于CD58提供的共刺激，它促進腫瘤增殖的效果更強），做這些適應(yīng)癥的時候需要更多調(diào)研和考慮。

目前做CD2共刺激有兩種流派，一是直接用CD58融合蛋白去結(jié)合CD2。用CD58融合蛋白會省去抗體發(fā)現(xiàn)的步驟，但是參照諾華的專利(US20200362054A1), CD58穩(wěn)定性不太好。CD58穩(wěn)定性差，斷裂之后帶來的后果如下圖[5]，可溶性CD58會起到幫助腫瘤細胞免疫逃逸的作用，所以CD58融合蛋白可能需要做改造，避免斷裂的發(fā)生。

另一種是開發(fā)anti-CD2抗體。一般來說，CD3/CD2/TAA三抗的TDCC會比CD3/TAA的TCE強不少。根據(jù)我的經(jīng)驗，我們觀察到如果腫瘤細胞本身就高表達CD58，三抗在殺傷上的優(yōu)勢會顯著縮小。所以為了不跟已經(jīng)存在的CD58競爭，也許可以開發(fā)結(jié)合CD2不同表位的抗體（如下圖，CD58結(jié)合在CD2 IgV區(qū)的61-75，106-120）。當然這種抗體需要考慮結(jié)合不同的表位是否能激活下游信號，激活的強度與第一信號搭配是否合適，這些都需要不同的assay去驗證。

02—靶向雙表位/雙TAA的TCE
雙表位的策略接受度越來越高，以ZG006對比Tarlatamab為例（非頭對頭，樣本數(shù)據(jù)有限，僅供參考）； 

均選取II期10mg組數(shù)據(jù)：ORR (60% vs 40%), 6個月DoR率(79.8% vs 68%), ZG006 6個月PFS率為53.1%，Tarlatamab mPFS=4.9m. 

目前看來ZG006至少不輸于Tarlatamab，并且有更優(yōu)的趨勢。對于表達拷貝數(shù)偏低，潛力還沒被榨干的靶點，雙表位的策略值得嘗試。

靶向雙TAA的TCE也是集中在血液瘤和自免，實體瘤目前數(shù)量比較有限，可以分為兩種策略。一是靶細胞為雙TAA表達的交集，適用于兩個dirty targets利用avidity效應(yīng)突出選擇性的優(yōu)勢（如下圖）：

可以看到齊魯這一款TCE對EGFR和cMET雙陽性的細胞殺傷比單陽強1000倍，有效殺傷腫瘤細胞的同時可以豁免對健康組織的損傷。潛在風(fēng)險在于，腫瘤細胞上任意抗原的下調(diào)和丟失會讓TCE的效果大打折扣。

另一種靶細胞為雙TAA表達的并集，適用于干凈的TAA盡量覆蓋更多的人群；潛在風(fēng)險在于要把控好兩個不同TAA的安全窗。與做兩種藥物的combo不同，把兩個TAA做在一個TCE上相當于fixed dose，需要根據(jù)兩個TAA的表達量，在正常組織中的表達譜（即人體對兩個TAA的耐受程度）來權(quán)衡TCE的活性。極力避免出現(xiàn)靶向TAA1還沒到起效劑量而TAA2已經(jīng)到了MTD的情況（如下圖）。

簡單思考一下我們會發(fā)現(xiàn)在雙抗TCE基礎(chǔ)上增加一個TAA之后要考量的因素呈指數(shù)放大，開發(fā)期間不可避免充斥著相互妥協(xié)，非�？简炑芯咳藛T思慮的周密和項目經(jīng)驗。總體來說開發(fā)針對實體瘤靶向雙TAA的TCE依然充滿挑戰(zhàn)。