利用熒光壽命光片顯微鏡進(jìn)行活體功能成像
光片顯微鏡已成為生物樣品快速、低光毒性體積成像不可或缺的工具，主要以標(biāo)準(zhǔn)格式提供結(jié)構(gòu)或分析物濃度數(shù)據(jù)。熒光壽命成像顯微鏡(FLIM)提供功能性對比度，但獲取速度往往有限，且實施復(fù)雜。因此，我們將專用的頻域CMOS FLIM相機(jī)和強(qiáng)度調(diào)制激光器集成到光片設(shè)置中，以增加熒光壽命成像功能，從而能夠快速采集具有濃度獨(dú)立對比度的體積數(shù)據(jù)。然后我們應(yīng)用該系統(tǒng)對活體轉(zhuǎn)基因斑馬魚進(jìn)行成像，展示了從體內(nèi)樣本快速收集體積FLIM 數(shù)據(jù)的能力。
生物學(xué)中的許多重要懸而未決的問題都需要在體內(nèi)以高時空分辨率對分子動力學(xué)進(jìn)行成像。光片顯微，在過去十鏡，或選擇性平面照明顯微鏡(SPIM)年中發(fā)展成為快速、低光漂白成像許多不同生物樣品的首選方法，特別是在體內(nèi)。
熒光終生成像顯微鏡(FLIM)是細(xì)胞生物學(xué)中實現(xiàn)濃度獨(dú)立性的重要方法。特別是，使用時間相關(guān)單光子計數(shù)(TCSPC)技術(shù)的時域FLIM是使用FRET方法測量分子動態(tài)相互作用的金標(biāo)準(zhǔn)。
然而，測量壽命的精確度取決于數(shù)量，因此 TCSPC-FLIM 本質(zhì)上是一個緩慢的過程，即使在多個處理器上多路復(fù)用時也是如此。這與在體內(nèi)平行快速運(yùn)動的細(xì)胞(如癌癥或免疫細(xì)胞)中測量壽命信號的需要是不相容的。
頻域(FD)-FLIM 可以比傳統(tǒng)光子計數(shù)方法提高采集速度，但由于應(yīng)用了調(diào)制頻率，其壽命精度受到限制。然而，如果已知樣品的預(yù)期壽命并適當(dāng)匹配調(diào)制頻率，F(xiàn)D-FLIM 是與廣場顯微鏡集成的明智選擇。其中只有光片可以提供快速的光學(xué)切片圖像。我們將采用CMOS相機(jī)(pco.flim)和調(diào)制二極管激光器轉(zhuǎn)換成數(shù)字掃描光片顯微鏡(DSLM)設(shè)置。以這種方式，我們結(jié)合的速度DSLM的三維成像與從FD-FLIM獲得的功能信息。
在文中描述了以前在光片顯微鏡配置中實現(xiàn)熒光壽命成像的方法。分別成像MDCK囊腫和細(xì)胞球體。兩項研究都使用了旋轉(zhuǎn)透鏡產(chǎn)生的光片，并在其設(shè)置中結(jié)合了門控圖像增強(qiáng)器(GII)。
德國Excelitas PCO公司pco.flim CMOS相機(jī)，具備高分辨率、高感光度、弱光成像的優(yōu)點(diǎn)，將顯微研究實驗過程完美記錄，為實驗提供強(qiáng)而有力的圖像數(shù)據(jù)支持。
廣州市元奧儀器有限公司作為德國Excelitas PCO公司攝像機(jī)在中國的代理商，為客戶提供各種成像系統(tǒng)解決方案，如對相關(guān)產(chǎn)品感到興趣，歡迎隨時聯(lián)系交流，公司網(wǎng)址：www.gzyaco.com、電話：400-860-2677。
- 蔡司2026CSCB回顧:里程碑簽約,國產(chǎn)化進(jìn)程戰(zhàn)略再進(jìn)階
- 徠卡將攜新品亮相中國細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會全國學(xué)術(shù)大會
- 徠卡直播預(yù)告：顯微鏡相機(jī)的指標(biāo)和性能參數(shù)
- 蔡司發(fā)布全新AI融合細(xì)胞培養(yǎng)和質(zhì)量控制解決方案
- 丹納赫旗下徠卡顯微系統(tǒng)全球總裁隨德國總理訪華
- EVIDENT全新發(fā)布集成技術(shù)清潔度解決方案
- 蔡司 Sigma 360 重磅推出 8 英寸晶圓全觀察方案
- 明美四通道熒光光源MG-120落戶湖北大學(xué)生科院
Copyright(C) 1998-2026 生物器材網(wǎng) 電話：021-64166852;13621656896 E-mail：info@bio-equip.com