非洲豬瘟對(duì)全球養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大沖擊，準(zhǔn)確、快速檢測(cè)至關(guān)重要，而非洲豬瘟測(cè)試儀在此過程中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。了解其關(guān)鍵技術(shù)原理與性能，能更好地利用它防控疫情。

　　關(guān)鍵技術(shù)原理

• 核酸檢測(cè)技術(shù)

　　實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)：許多非洲豬瘟測(cè)試儀基于實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)。非洲豬瘟病毒的遺傳物質(zhì)為 DNA ，該技術(shù)針對(duì)病毒特定的 DNA 片段設(shè)計(jì)引物和熒光探針。在 PCR 反應(yīng)體系中，引物引導(dǎo)目標(biāo) DNA 片段復(fù)制擴(kuò)增，隨著擴(kuò)增進(jìn)行，熒光探針與目標(biāo)片段結(jié)合，在特定光照下發(fā)出熒光。儀器通過監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)強(qiáng)度，實(shí)時(shí)記錄擴(kuò)增過程。依據(jù)熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定閾值時(shí)的循環(huán)數(shù)(Ct 值)，判斷樣本中是否存在非洲豬瘟病毒核酸及病毒含量。Ct 值越低，表明樣本中病毒含量越高。例如，當(dāng)樣本中病毒核酸量較多，在較少的循環(huán)次數(shù)下熒光信號(hào)就能達(dá)到閾值，Ct 值就低。這種技術(shù)靈敏度高，哪怕樣本中病毒含量極微，也能精準(zhǔn)檢測(cè)，為早期診斷提供有力支持。

• 等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)

部分測(cè)試儀采用等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)，如環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)。它針對(duì)非洲豬瘟病毒多個(gè)特定基因區(qū)域設(shè)計(jì)多對(duì)引物，在等溫條件下，利用具有鏈置換活性的 DNA 聚合酶實(shí)現(xiàn)核酸快速擴(kuò)增。反應(yīng)過程中加入熒光染料，當(dāng)有擴(kuò)增產(chǎn)物生成，染料嵌入雙鏈 DNA 使反應(yīng)體系產(chǎn)生熒光信號(hào)。通過檢測(cè)熒光信號(hào)有無及強(qiáng)度，判斷樣本中是否存在病毒核酸。與傳統(tǒng) PCR 需復(fù)雜溫度循環(huán)不同，等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)操作簡便、快速，無需專業(yè)且昂貴的熱循環(huán)設(shè)備，適合基層實(shí)驗(yàn)室或現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。

• 免疫檢測(cè)技術(shù)

　　酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)技術(shù)：基于抗原 - 抗體特異性結(jié)合原理，ELISA 技術(shù)也常用于非洲豬瘟檢測(cè)。將非洲豬瘟病毒特異性抗體固定在微孔板上，加入經(jīng)過處理的樣本，若樣本中有病毒抗原，抗原會(huì)與抗體結(jié)合。之后加入酶標(biāo)記的二抗，二抗與抗原 - 抗體復(fù)合物結(jié)合。最后加入底物，在酶作用下發(fā)生顯色反應(yīng)。通過酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度，判斷樣本中病毒抗原或抗體含量，確定豬只是否感染。此方法可大規(guī)模檢測(cè)樣本，廣泛應(yīng)用于疫情篩查。例如，在大型養(yǎng)殖場(chǎng)批量檢測(cè)中，能高效得出結(jié)果。

• 免疫層析技術(shù)

免疫層析技術(shù)常以試紙條形式呈現(xiàn)。將非洲豬瘟病毒特異性抗體固定在試紙條上，樣本中的病毒抗原與抗體結(jié)合后，隨樣本溶液在試紙條上因毛細(xì)作用移動(dòng)。當(dāng)遇到標(biāo)記有顯色物質(zhì)(如膠體金)的抗體時(shí)，形成抗原 - 抗體 - 標(biāo)記物復(fù)合物，在檢測(cè)線處顯示出顏色條帶。若樣本中無病毒抗原，則檢測(cè)線不出現(xiàn)條帶。通過觀察檢測(cè)線和對(duì)照線處條帶情況，快速判斷樣本是否陽性。這種方法操作簡單、快速，無需復(fù)雜儀器，適合現(xiàn)場(chǎng)初步篩查。

　　性能解析

• 準(zhǔn)確性

　　測(cè)試儀的準(zhǔn)確性至關(guān)重要�；�于上述技術(shù)原理，通過優(yōu)化引物、探針或抗體設(shè)計(jì)，以及精確控制反應(yīng)條件，能提高檢測(cè)準(zhǔn)確性。如實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中，引物和探針與病毒核酸的特異性結(jié)合，可減少誤判。免疫檢測(cè)中，高特異性抗體選擇，能避免非特異性反應(yīng)，確保結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

• 檢測(cè)速度

　　不同技術(shù)原理決定了測(cè)試儀檢測(cè)速度有差異。等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)和免疫層析技術(shù)檢測(cè)速度較快，等溫?cái)U(kuò)增通常 30 分鐘左右完成，免疫層析 5 - 15 分鐘可見結(jié)果，適合應(yīng)急檢測(cè)和現(xiàn)場(chǎng)快速篩查。實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 和 ELISA 技術(shù)雖相對(duì)耗時(shí)，但通過優(yōu)化反應(yīng)程序和設(shè)備性能，也能在可接受時(shí)間內(nèi)出結(jié)果，滿足疫情防控需求。

• 操作便捷性

　　部分測(cè)試儀設(shè)計(jì)緊湊，操作界面簡潔易懂，對(duì)操作人員專業(yè)要求相對(duì)較低。尤其基于免疫層析技術(shù)的試紙條，操作簡單，經(jīng)過簡單培訓(xùn)即可上手。一些采用技術(shù)的測(cè)試儀，雖技術(shù)復(fù)雜，但設(shè)備自動(dòng)化程度高，樣本處理、檢測(cè)等步驟自動(dòng)完成，也提升了操作便捷性。

　　【JD-ZW216】非洲豬瘟測(cè)試儀憑借多種關(guān)鍵技術(shù)原理，在準(zhǔn)確性、檢測(cè)速度和操作便捷性等性能方面表現(xiàn)出色，為非洲豬瘟防控提供了有力技術(shù)支持，助力養(yǎng)豬業(yè)應(yīng)對(duì)疫情挑戰(zhàn)。