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基于CytoFLEX mosaic 88的32色光譜流式細(xì)胞分析方案

瀏覽次數(shù):1341 發(fā)布日期:2025-7-28  來源:貝克曼庫爾特
這項研究的背景是什么?
貝克曼庫爾特生命科學(xué)與美國麻省理工學(xué)院、哈佛大學(xué)博德研究所、Luminous Bioanalytical Consulting聯(lián)合開發(fā)了一套基于CytoFLEX mosaic的32色光譜流式細(xì)胞分析方案,用于人B細(xì)胞亞群的深度免疫表型分析。
該方案覆蓋B細(xì)胞的活化、分化及功能相關(guān)標(biāo)志物,并整合了髓系細(xì)胞亞群和慢性淋巴細(xì)胞白血。–LL)相關(guān)的免疫標(biāo)志物,能夠繪制完整的免疫圖譜。
 
實驗使用了哪些樣本?
  • 冷凍保存的PBMC(外周血單個核細(xì)胞)
  • 健康供體的骨髓樣本
實驗驗證顯示,該方法適用于臨床樣本的回顧性分析,可從有限樣本中獲取高維免疫信息,對轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究具有實際應(yīng)用價值。

該方案使用了什么平臺?
  • 所有實驗在CytoFLEX mosaic 88光譜檢測模塊上完成。
  • 該模塊是CytoFLEX系列最新產(chǎn)品,專為高參數(shù)光譜分析而設(shè)計,搭載紫外激光器,支持靈活配置。
  • 結(jié)合雙棲光學(xué)路徑與雙算法分析引擎,提升多色實驗的精度與穩(wěn)定性。
實驗流程概覽(高亮步驟)
1. 樣本復(fù)蘇與細(xì)胞處理
  • PBMC快速復(fù)蘇,離心清洗,使用Cellaca+AOPI染色計數(shù)并調(diào)整濃度。
  • 分裝入流式管準(zhǔn)備染色。
2. 抗體染色流程
  • 進(jìn)行活性染色、Fc受體封閉、單核細(xì)胞阻斷。
  • 使用抗IgG抗體及混合抗體孵育并過濾待上機(jī)。
3. 設(shè)定對照與數(shù)據(jù)采集
  • 配置單色對照、未染色對照及活性對照。
  • 在mosaic 88模塊進(jìn)行數(shù)據(jù)采集與分析。
抗體組合和檢測結(jié)果有哪些亮點?
  • 32種抗體組合覆蓋關(guān)鍵免疫亞群(表詳見附件)。
  • 熒光擴(kuò)散矩陣(SSM)顯示良好的信號分離性。
  • 設(shè)門邏輯清晰,能夠精準(zhǔn)區(qū)分B細(xì)胞不同亞群。
實驗結(jié)果圖示

圖1:熒光溢出擴(kuò)散矩陣(SSM)——展示染料之間的光譜重疊情況。

圖2:細(xì)胞設(shè)門策略——展示免疫亞群的區(qū)分邏輯與分布。
 
這項方案的優(yōu)勢是什么?
  • 可在樣本量受限的情況下實現(xiàn)高維單細(xì)胞免疫圖譜構(gòu)建。
  • 適用于基礎(chǔ)免疫研究、疾病免疫監(jiān)測及臨床轉(zhuǎn)化研究。
  • 基于CytoFLEX mosaic 88的出色光譜分辨能力,提升了高通量流式分析的實用性。
 
結(jié)論總結(jié)
本研究展示了基于CytoFLEX mosaic的32色光譜流式檢測方案的強(qiáng)大性能。其在B細(xì)胞高維分析中的應(yīng)用證明了其在科研和臨床領(lǐng)域的廣泛潛力。
 
“雙擎驅(qū)動,洞見多維” —— CytoFLEX mosaic結(jié)合高靈敏度檢測模塊與智能分析軟件,助力光譜流式技術(shù)突破傳統(tǒng),開啟更高維度的單細(xì)胞免疫探索新時代。
 
如需獲取抗體組合表或原始實驗?zāi)0,請?lián)系貝克曼庫爾特生命科學(xué)團(tuán)隊。
 
發(fā)布者:貝克曼庫爾特生命科學(xué)
聯(lián)系電話:400 168 5267
E-mail:apls@beckman.com

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