本研究由Yasuyuki Hanada, Semanti Halder, Yuichiro Arima, Misato Haruta, Honami Ogoh, Shuntaro Ogura, Yukihiko Shiraki, Sota Nakano, Yuka Ozeki, Shigetomo Fukuhara, Akiyoshi Uemura, Toyoaki Murohara和Koichi Nishiyama共同完成，論文題為"Biomechanical control of vascular morphogenesis by the surrounding stiffness"，于2025年7月在《Nature Communications》正式發(fā)表。

技術(shù)原理
傳統(tǒng)血管生成研究主要依賴生化因子分析（如VEGF信號通路），但難以解釋機械環(huán)境的影響。本研究采用的微流體芯片技術(shù)突破了這一局限，通過三維重構(gòu)血管生成過程，結(jié)合先進光學(xué)成像，實現(xiàn)了力學(xué)參數(shù)的可控調(diào)節(jié)與實時觀測。其獨特機制在于將力學(xué)信號（如基質(zhì)剛度、流體壓力）與細(xì)胞行為（遷移、極性建立）直接關(guān)聯(lián)，建立了從分子到組織的多尺度分析平臺。

關(guān)鍵技術(shù)的原理包括：微流體芯片技術(shù)通過模擬體內(nèi)三維環(huán)境，使內(nèi)皮細(xì)胞在 fibrin-collagen 凝膠中形成血管樣結(jié)構(gòu)，并允許外部干預(yù)如壓力加載和剛度調(diào)節(jié)；時間推移差分干涉對比（DIC）成像以5-15分鐘間隔連續(xù)記錄，捕捉細(xì)胞遷移與管腔形成的動態(tài)過程，通過核追蹤和管腔面積量化揭示動力學(xué)關(guān)系；共聚焦顯微鏡z軸掃描結(jié)合三維重建，實現(xiàn)了血管基底膜成分的精確可視化，例如通過無去垢劑全樣本染色定量分析IV型膠原沉積；粒子追蹤微流變學(xué)（PTM）技術(shù)通過植入熒光微球并追蹤其熱波動來量化局部基質(zhì)剛度，creep compliance值越低表明剛度越高，該方法實現(xiàn)了血管周圍微環(huán)境的原位力學(xué)表征。

重要發(fā)現(xiàn)
本研究的核心貢獻是揭示了周圍剛度通過力學(xué)平衡整合血管分支伸長和管腔發(fā)育。實驗過程中，采用微流體芯片系統(tǒng)重構(gòu)血管生成，通過時間推移DIC成像每5-15分鐘記錄動態(tài)，顯示管腔 emergence 和擴張抑制了尖端內(nèi)皮細(xì)胞的定向遷移。

共聚焦顯微鏡z軸掃描進一步量化血管基底膜組成，發(fā)現(xiàn)周細(xì)胞增強IV型膠原沉積，增加周圍剛度。

PTM技術(shù)通過熒光珠子熱波動測量剛度，證實周細(xì)胞或轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶處理能顯著提升 creep compliance，限制管腔擴張。結(jié)論表明，周細(xì)胞通過促進EC源性Col-IV沉積增加剛度，從而維持F-BAR蛋白和Arp2/3復(fù)合物在細(xì)胞前緣的定位，優(yōu)化定向遷移和分支伸長。

挑戰(zhàn)與展望
當(dāng)前臨床轉(zhuǎn)化面臨的主要障礙包括技術(shù)復(fù)雜性高、活體應(yīng)用難度大以及成本昂貴；例如，微流體芯片和高端顯微鏡的集成需要專門技能，限制了大范圍推廣，而活體環(huán)境中力學(xué)參數(shù)的實時監(jiān)測仍缺乏非侵入性方法。未來研究方向應(yīng)聚焦于開發(fā)簡化型光學(xué)設(shè)備、探索力學(xué)傳感的分子機制（如機械敏感蛋白通路），以及推動多學(xué)科合作實現(xiàn)從實驗室到臨床的過渡，最終為腫瘤血管正常化和組織再生療法提供可行策略。

DOI:10.1038/s41467-025-61804-z.