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如何結(jié)合液氮使用Bullet Blender破碎組織細(xì)胞

瀏覽次數(shù):5796 發(fā)布日期:2010-6-25  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
      對(duì)于一些特別堅(jiān)硬或韌性比較強(qiáng)的樣品,如:硬骨骼、軟骨、指甲、魚鱗、結(jié)締組織、種子等,使用普通機(jī)械研磨方法很難即保證研磨破碎效果又保證樣品一直處于低溫狀態(tài)。傳統(tǒng)手工研磨方法雖然能二者兼顧,但是當(dāng)樣品數(shù)量比較多時(shí),手動(dòng)研磨非常費(fèi)時(shí)費(fèi)力,而且經(jīng)常存在交叉污染的可能。如果提取RNA、酶等對(duì)溫度比較敏感的物質(zhì),使用液氮進(jìn)行預(yù)處理,保證樣品在破碎過程中一直處于低溫是非常重要的。

        使用Bullet Blender進(jìn)行組織細(xì)胞的破碎時(shí),將樣品用液氮進(jìn)行預(yù)冷凍,這樣既能保證樣品的破碎效率又能保證樣品一直處于低溫狀態(tài)。以骨骼和植物葉片為例,具體操作方法如下:

        骨骼:

        取0.3克骨骼,用濾紙吸取骨骼表面水分,放入樣品管,加入1.6mm不銹鋼研磨珠5粒,再加3勺0.5mm不銹鋼研磨珠,蓋上管蓋。將整個(gè)試管放入液氮中冷凍10到20秒鐘,然后放入機(jī)器處理20秒鐘。取出樣品管可見樣品被破碎成乳白色粉末,然后加入提取緩沖液,再處理1分鐘或直接進(jìn)行后續(xù)提取,加入緩沖液之前能保證樣品溫度一直為-20℃以下。

        葉片:

        取0.2克植物葉片,清潔葉片表面后放入樣品管,加入2.0mm氧化鋯研磨珠5粒,再加3勺1.0mm氧化鋯研磨珠,蓋上管蓋。將整個(gè)試管放入液氮中冷凍10到20秒鐘,然后放入機(jī)器處理20秒鐘。取出樣品管可見葉片被破碎成綠色粉末,然后加入提取緩沖液,再處理1分鐘或直接進(jìn)行后續(xù)提取,加入緩沖液之前能保證樣品溫度一直為-20℃以下。

注意:樣品管必需使用Eppendorf 1.5mL Safe-Lock微量離心管(訂貨號(hào):0030 120.086)。

產(chǎn)品詳細(xì)介紹見:http://www.bio-xplorer.com/_d269808107.htm

我公司為美國Next Advance公司在中國區(qū)(含香港)的獨(dú)家授權(quán)代理商。

發(fā)布者:杰靈儀器(天津)有限公司
聯(lián)系電話:022-23354927
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