克隆技術(shù)是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的核心技術(shù)之一。通過(guò)PCR擴(kuò)增獲得的DNA片段通常需要克隆到質(zhì)粒載體中，用于測(cè)序、亞克隆、表達(dá)等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。利用Taq DNA聚合酶在產(chǎn)物的3’-端添加一個(gè)突出A堿基的特點(diǎn)而設(shè)計(jì)的TA克隆技術(shù)，使得PCR產(chǎn)物克隆變得更加方便、高效：

PCR引物不需要設(shè)計(jì)限制性內(nèi)切酶識(shí)別序列；

PCR產(chǎn)物不必進(jìn)行酶切、末端補(bǔ)平或添加接頭等處理；

高拷貝的載體和通用的引物序列，便于測(cè)序、擴(kuò)增、酶切。

 

GenStar公司現(xiàn)階段提供兩套PCR克隆系統(tǒng)：用于克隆含有3’-端突出A堿基的PCR產(chǎn)物的EZ-T載體及其相應(yīng)的快速連接反應(yīng)試劑盒，以及用于克隆不含3’-端突出堿基的平末端PCR產(chǎn)物的EZ-Blunt平端載體及其相應(yīng)的連接反應(yīng)試劑盒。同時(shí)，GenStar公司開(kāi)發(fā)了一款新型的EZ-Lyse克隆快速檢測(cè)試劑盒，方便研究者短時(shí)間內(nèi)快速篩選到目的克隆，進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)