M2點(diǎn)樣儀助力沙門氏菌血清分型檢測

瀏覽次數(shù)：1200　發(fā)布日期：2025-2-20　來源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責(zé)任自負(fù)

沙門氏菌是一種能引起食源性疾病的細(xì)菌，廣泛存在于各種食物、水、土壤以及動物糞便中。世界范圍內(nèi)每年患病人數(shù)約9500萬例，癥狀表現(xiàn)為腹瀉、發(fā)燒、腹部痙攣和嘔吐等，嚴(yán)重可導(dǎo)致脫水性敗血癥甚至死亡。其血清亞型超過2500種，分型通常與宿主或地理位置有關(guān)，傳統(tǒng)的凝集法不僅需要有豐富的技術(shù)經(jīng)驗(yàn)，消耗大量的試劑和樣品，檢測周期也較長。相比之下，蛋白微陣列法（蛋白芯片檢測技術(shù)）快速、特異性強(qiáng)、操作簡單，同時(shí)不受限于數(shù)據(jù)庫。另外，利用不同的特異性抗體檢測多種抗原血清，可在一次實(shí)驗(yàn)中分析多種病原體。

2024年4月，來自德國萊布尼茨光子技術(shù)研究所和耶拿大學(xué)感染診斷學(xué)研究中心的Ralf Ehricht教授團(tuán)隊(duì)，在Pathogens雜志上發(fā)表了一篇題目為“A Proof-of-Concept Protein Microarray-Based Approach for Serotyping of Salmonella enterica Strains”的文章�；诘鞍孜㈥嚵校ǖ鞍仔酒瑱z測技術(shù)）對腸道沙門氏菌進(jìn)行血清分型。

該團(tuán)隊(duì)收集10種沙門氏菌免疫血清，并用緩沖液分別稀釋6、8、10和20倍，大腸桿菌和 PBS 緩沖液為陰性對照，德國M2-Automation生物芯片點(diǎn)樣儀以17 × 17微陣列點(diǎn)樣到96孔板（孔內(nèi)底部功能化處理），每種樣品重復(fù)點(diǎn)印至少四次（單孔內(nèi)4個(gè)重復(fù)），點(diǎn)間距0.22 mm，靜置偶聯(lián)10分鐘后，制備成微孔板蛋白芯片（如圖1）。

圖1:腸道沙門氏菌亞群蛋白微陣列芯片
（左圖：10種沙門氏菌免疫血清1:6/1:8/1:10/1:20稀釋后的點(diǎn)樣陣列排布，4個(gè)重復(fù)陣列；右圖：單孔內(nèi)陣列示意圖）

隨后將32種不同的腸道鏈球菌亞型和1種邦戈沙門氏菌的菌株細(xì)胞，大腸桿菌細(xì)胞、PBS緩沖液分別加到微孔板蛋白芯片上，用HRP標(biāo)記的抗沙門氏菌多克隆抗體雜交，繼而加入TMB（四甲基聯(lián)苯胺）底物顯色進(jìn)行斑點(diǎn)檢測和數(shù)據(jù)分析（如圖2）。

圖2：基因分型檢測示意圖：沙門氏菌O或H抗原與特異性免疫血清結(jié)合，被酶標(biāo)捕獲抗體捕獲，最后使用TMB（四甲基聯(lián)苯胺）底物催化顯色，進(jìn)行信號檢測。

結(jié)果：基于微陣列的斑點(diǎn)檢測和數(shù)據(jù)分析，結(jié)合所有點(diǎn)樣血清類型，顯示出血清分型的高度準(zhǔn)確性和特異性（如圖3）

圖3: 基因分型的結(jié)果分析（準(zhǔn)確度、靈敏度、特異性、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值）

微陣列檢測具有足夠的靈敏性和特異性，可有效用于血清分型或菌株篩選，是一種極具前景的快速檢測手段和方法。

原文鏈接：https://doi.org/10.3390/ pathogens13050355

M2-Automation成立于2003年，總部位于德國柏林，是一家創(chuàng)新技術(shù)開發(fā)公司，專注于微量/超微量、非接觸式自動化移液和生物芯片點(diǎn)樣技術(shù)。儀器準(zhǔn)確性、精確性高，重復(fù)性好，全程自動化點(diǎn)樣，同時(shí)可根據(jù)客戶需求進(jìn)行定制。