圖1.人原代肝細胞在藥物研發(fā)中的應(yīng)用

二、人原代肝細胞選擇的核心評估維度
(一) 貼壁能力與貼壁程度（Palatability / Degree of Palatability）
1. 核心定義：描述每批細胞的貼壁效率，以及在不同孔板規(guī)格的工作效能，是選擇成功的關(guān)鍵因素，直接影響藥物毒性篩選和體外代謝活性檢測的重復(fù)性。

2.關(guān)鍵注意點：

• 24 孔板或6孔板中貼壁效果良好的肝細胞，在96孔板或384孔板未必能有效貼壁或正常發(fā)揮作用；
• 并非每一批次的肝細胞都能良好附著于標(biāo)準(zhǔn)塑料培養(yǎng)器皿或膠原蛋白包被的96孔板。
• 若采用 384 孔板進行高通量毒性篩選，建議優(yōu)先選擇經(jīng)該規(guī)格孔板驗證的肝細胞批次。

3.額外考量問題：

• 解凍復(fù)蘇過程中的規(guī)范操作；
• 合適接種密度的評估；
• 隨時間變化的細胞形態(tài)特征與肝功能表現(xiàn)
• 該批次肝細胞適用于懸浮培養(yǎng)還是貼壁培養(yǎng)場景。

(二) 存活時長（Longevity）
1.選擇邏輯：實驗持續(xù)時間決定肝細胞所需存活時長，需結(jié)合具體研究周期匹配。
2.分類選擇：

• 短期培養(yǎng)實驗需求：短期貼壁型或懸浮型肝細胞（功能維持時間可達72小時）可滿足基礎(chǔ)代謝穩(wěn)定性和代謝產(chǎn)物鑒定研究、初步毒性篩查等短周期實驗需求；
• 中/長期培養(yǎng)實驗需求：采用 96 孔板或 384 孔板檢測，或特定應(yīng)用場景如體外酶誘導(dǎo)研究（一周的誘導(dǎo)試驗）需選擇中期貼壁肝細胞，長周期實驗研究（如慢代謝化合物的代謝評估等）需選擇存活時長可達兩周，且功能穩(wěn)定的貼壁型肝細胞。

圖2. 原代肝細胞的貼壁時長分類與功能表征

(三) 供體相關(guān)考量
1.生命階段（供體年齡）（Life stages, or donor ages）：新生兒至 2 歲幼兒的肝細胞表型與成人存在差異，需根據(jù)研究目的（如兒科藥物研發(fā)、成人疾病建模）選擇匹配供體年齡的肝細胞批次，建議與供體來源多樣化的機構(gòu)合作。

2.供體信息的廣度與深度：需獲取詳細供體信息，包括病史、傳染病暴露史及其他人口統(tǒng)計學(xué)特征，這些因素均可能影響肝細胞對特定研究的適用性，是確保肝細胞批次穩(wěn)定性及臨床前藥物研發(fā)數(shù)據(jù)可靠的關(guān)鍵。

3.組織與細胞來源：

• 核心需求：獲取健康和疾病供體的高質(zhì)量人類細胞，對毒性測試、ADME 研究及疾病建模起著關(guān)鍵作用。
• 選擇建議：優(yōu)先選擇垂直整合型機構(gòu)，其能在捐贈同意、組織回收、保存、分離、鑒定及質(zhì)量控制全流程提供全面保障和信息，降低細胞來源不確定性帶來的實驗風(fēng)險。

4.健康肝細胞與疾病肝細胞（Healthy vs. diseased hepatocytes）：
兩種選擇路徑均合理，關(guān)鍵在于明確研究目的：

• 路徑一：在健康細胞中誘導(dǎo)疾病狀態(tài)，適用于探索疾病發(fā)病機制、篩選針對性干預(yù)藥物的研究；
• 路徑二：直接使用來自疾病組織的肝細胞，更貼近臨床疾病狀態(tài)，適用于疾病特異性藥物代謝、毒性評估；

注意事項：兩種方法的起點和實驗完成結(jié)果受研究設(shè)計和培養(yǎng)條件影響，需配合規(guī)范的鑒定流程，詳細的組織病理學(xué)報告可提供選擇支持。

5.病理學(xué)評估：需獲取肝細胞相關(guān)病理學(xué)評級數(shù)據(jù)，包括纖維化程度、炎性反應(yīng)程度、脂肪變性、肝細胞氣球樣變、非酒精性脂肪肝疾病及非酒精性脂肪性肝炎等指標(biāo)，病理學(xué)記錄對疾病建模、毒性機制研究具有重要參考價值。

(四) 細胞質(zhì)量與產(chǎn)量相關(guān)
1.解凍后存活率與產(chǎn)量（Post-thaw Viability and Yield）：

• 核心標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)行業(yè)共識，肝細胞解凍后存活率合格基礎(chǔ)標(biāo)準(zhǔn)為70%；LifeNet Health 可提供存活率達80%以上的肝細胞批次，進一步提升實驗成功率
• 產(chǎn)量范圍：每個凍存管常規(guī)存活細胞產(chǎn)量為500萬至1000萬個，當(dāng)前技術(shù)可進一步提升該數(shù)值。
• 延伸考量：除存活率外，使用高內(nèi)涵成像、球體形成、微生理系統(tǒng)（MPS）等高精度技術(shù)的研究，還需關(guān)注細胞形態(tài)均一性、細胞間連接完整性等形態(tài)特征和結(jié)合特性。

2.每管細胞數(shù)量（Number of cells per vial）：根據(jù)應(yīng)用場景選擇，微芯片及新型流體技術(shù)所需細胞數(shù)量較少，其他場景（如大規(guī)模毒性篩選）或計劃開展額外實驗時需選擇每管細胞數(shù)量更多的規(guī)格，LifeNet Health提供多種規(guī)格批次選擇，適配不同實驗規(guī)模需求。 

3.每批次管數(shù)（Number of vials per lot）：不同批次管數(shù)存在差異，LifeNet Health 的肝細胞批次平均每批450管，可達1200管，能滿足長期研究、多重復(fù)實驗的批次一致性需求。

(五) 細胞功能相關(guān)評估
1.酶譜分析（Enzyme Profiling）：

• 核心關(guān)注對象：主要細胞色素P450（CYP）酶（藥物代謝和藥物相互作用關(guān)鍵酶）、7-乙氧基香豆素（行業(yè)公認的 II 相代謝標(biāo)準(zhǔn)指標(biāo)）。
• 關(guān)鍵詢問點：酶譜分析數(shù)據(jù)是否代表正�；蚱骄�水平，是否存在等位基因多態(tài)性相關(guān)提示，避免因酶活性異常導(dǎo)致藥物代謝數(shù)據(jù)偏差。

2.誘導(dǎo)潛能評估（Induction Potential）：依據(jù)ICH M12指南要求：體外酶誘導(dǎo)評估需對實驗系統(tǒng)進行驗證，以證明主要CYP酶具備功能活性，且可被陽性對照藥物誘導(dǎo)。指南明確規(guī)定，CYP1A2、2B6和3A4陽性對照的響應(yīng)值（mRNA倍數(shù)變化）至少增加6倍，需確認肝細胞批次符合該標(biāo)準(zhǔn)。

3.可選或定制化數(shù)據(jù)（Optional or Custom Data）：需確認供應(yīng)商是否可提供額外所需信息，如轉(zhuǎn)運蛋白的表達或功能活性、黃素單加氧酶（FMOs）、醛氧化酶（AOs）等相關(guān)通路數(shù)據(jù)，滿足特殊藥物代謝機制研究需求。

(六) 細胞應(yīng)用場景適配性
需結(jié)合具體應(yīng)用場景評估肝細胞功能是否滿足需求：

• 3D 模型研究：選擇具有良好自黏附性和植入特性、能在體外形成球體結(jié)構(gòu)的肝細胞批次，保障3D培養(yǎng)體系的穩(wěn)定性；

圖3. 人原代肝細胞球體形成

• ADME研究（微生理系統(tǒng) MPS 應(yīng)用）：選擇兼具良好貼壁性與代謝酶活性穩(wěn)定性的肝細胞，適配微流控芯片等技術(shù)系統(tǒng)； 

• 高通量篩選：優(yōu)先選擇貼壁效率均一、功能穩(wěn)定的肝細胞批次，確保大規(guī)模實驗的數(shù)據(jù)重復(fù)性。

(七) 供應(yīng)商支持與服務(wù)
選擇能提供全周期支持的供應(yīng)商，LifeNet Health在采購前、采購過程中及采購后均提供全方位支持，涵蓋批次篩選、實驗方案適配、技術(shù)問題解決方案、合規(guī)進口流程等，深度合作支持能有效降低實驗風(fēng)險，是確保研究成功的關(guān)鍵因素。

三、不同研發(fā)階段的肝細胞選擇側(cè)重點

四、 選擇肝細胞過程中的常見誤區(qū)與規(guī)避方法
1.誤區(qū)一：僅以COA報告作為選擇依據(jù)
規(guī)避方法：COA為基礎(chǔ)參考起點，需結(jié)合實驗設(shè)計、實驗檢測體系及研究目標(biāo)制定額外鑒定策略（如功能預(yù)實驗、批次穩(wěn)定性驗證）。

2.誤區(qū)二：只關(guān)注解凍后存活率，忽視其他指標(biāo)
規(guī)避方法：根據(jù)應(yīng)用場景補充關(guān)注細胞形態(tài)均一性、功能活性（如酶活性）、批次穩(wěn)定性等特征，評估細胞適用性。

3.誤區(qū)三：忽略供體信息的完整性
規(guī)避方法：主動索取供體病史、傳染病暴露史、人口統(tǒng)計學(xué)特征等詳細信息，避免因供體背景差異導(dǎo)致實驗數(shù)據(jù)偏差。

4.誤區(qū)四：未結(jié)合應(yīng)用場景選擇適配細胞
規(guī)避方法：明確實驗體系（如孔板規(guī)格、培養(yǎng)方式）和技術(shù)需求（如3D模型、高精度檢測），針對性選擇細胞特性，提升實驗匹配度。

五、 選擇肝細胞決策FAQ
1.Q：健康肝細胞誘導(dǎo)疾病狀態(tài)與直接使用疾病肝細胞，哪種更優(yōu)？
A：兩種方法均合理，核心取決于研究目的：探索發(fā)病機制可選擇健康細胞誘導(dǎo)疾病狀態(tài)，評估疾病特異性藥物效果可選擇直接來源的疾病肝細胞；需注意研究設(shè)計和培養(yǎng)條件會影響實驗完成結(jié)果，且需配合規(guī)范鑒定流程。

2.Q：肝細胞解凍后存活率的合格基礎(chǔ)標(biāo)準(zhǔn)是什么？
A：根據(jù)行業(yè)共識，合格基礎(chǔ)標(biāo)準(zhǔn)為70%；若使用高精度技術(shù)（如 MPS）或?qū)ρ芯靠煽啃砸�求較高，建議選擇存活率80%以上的批次（如 LifeNet Health 提供的肝細胞）。

3.Q：如何確定每管細胞數(shù)量和每批次管數(shù)的需求？
A：根據(jù)實驗技術(shù)（如微芯片技術(shù)需少量細胞、高通量篩選需更多細胞）、實驗規(guī)模及是否計劃開展額外驗證實驗判斷，供應(yīng)商可提供多規(guī)格批次選擇（如 LifeNet Health），建議預(yù)留10%-20%的細胞量用于應(yīng)急補充。

4.Q：選擇供應(yīng)商時，除產(chǎn)品本身外還需關(guān)注什么？
A：重點關(guān)注供應(yīng)商的全周期支持能力，包括采購前批次篩選指導(dǎo)、采購中需求對接、采購后技術(shù)問題解決、合規(guī)文件提供等服務(wù)，同時考察供應(yīng)商的細胞來源質(zhì)控體系。

5.Q：酶譜分析中需重點關(guān)注哪些指標(biāo)？
A：需重點關(guān)注主要細胞色素P450（CYP）酶相關(guān)數(shù)據(jù)、7-乙氧基香豆素指標(biāo)，同時需確認數(shù)據(jù)是否為正常 / 平均水平及是否存在等位基因多態(tài)性提示，確保藥物代謝數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

六、 LifeNet品牌信息
LifeNet Health專注于提供高質(zhì)量原代人肝細胞及專業(yè)科研支持，擁有充足肝細胞庫存，可提供存活率80%以上的產(chǎn)品、多規(guī)格細胞選擇及全流程技術(shù)服務(wù)，適配臨床前藥物研發(fā)中的疾病建模、ADME/DMPK及毒理學(xué)研究等多場景需求。每個產(chǎn)品均通過嚴格的質(zhì)量控制體系，符合臨床前科研實驗的合規(guī)要求。

作為美國知名的器官獲取組織（OPO），LifeNet Health 在高質(zhì)量組織獲取領(lǐng)域依托全流程管控能力、合規(guī)體系與技術(shù)優(yōu)勢，形成了差異化競爭力，核心優(yōu)勢可概括為以下4點：
1.全周期垂直整合能力，保障組織來源可控性：從捐贈同意環(huán)節(jié)起，LifeNet Health 實現(xiàn)對組織獲取全流程的垂直管理，涵蓋組織回收、低溫保存、專業(yè)分離、功能鑒定及質(zhì)量控制等關(guān)鍵環(huán)節(jié)。不同于傳統(tǒng)分散式流程，其一體化管控可減少中間環(huán)節(jié)的信息斷層與操作偏差，確保每一批次組織（如原代人肝細胞所需的肝臟組織）從來源到處理的全程可追溯，降低組織污染或功能損傷風(fēng)險。

2.嚴格合規(guī)與倫理標(biāo)準(zhǔn)，夯實組織獲取合法性：嚴格遵循美國器官植入與組織獲取相關(guān)法規(guī)（如《統(tǒng)一人體組織捐獻法》），在捐贈者篩選、知情同意流程、傳染病篩查（如乙肝、丙肝、HIV 等）環(huán)節(jié)建立標(biāo)準(zhǔn)化體系。同時，通過倫理委員會監(jiān)管，確保組織獲取全程符合醫(yī)學(xué)倫理要求，避免因合規(guī)問題影響組織質(zhì)量或科研 / 臨床應(yīng)用合法性，尤其適配藥物研發(fā)中對“組織來源合規(guī)性”的嚴格需求。

3.專業(yè)化技術(shù)支撐，提升組織活性與利用率：憑借高性能的組織保存與處理技術(shù)（如優(yōu)化的低溫灌注、冷凍保存方案），LifeNet Health能在組織離體后快速維持其生理功能與細胞活力——以肝臟組織為例，可有效減少缺血再灌注損傷，保障后續(xù)分離的原代肝細胞存活率（如前文提及的“解凍后存活率達80%以上”）。此外，其對組織的病理學(xué)評估（如纖維化程度、炎性反應(yīng)程度檢測）可提前篩選出符合科研/臨床需求的高質(zhì)量組織，提升組織利用率。

4.多樣化供體資源與定制化服務(wù)，匹配多元需求：依托完善的合作網(wǎng)絡(luò)，LifeNet Health 可獲取涵蓋不同年齡（新生兒至成人）、健康狀態(tài)（健康供體與疾病供體）的多樣化組織資源，滿足藥物研發(fā)中“疾病建模”“毒性測試”等不同場景對組織的細分需求（如肝病研究所需的病變肝臟組織）。同時，針對科研機構(gòu)或企業(yè)的定制化需求，可提供組織獲取后的專屬鑒定報告（如肝細胞酶譜分析、功能活性檢測數(shù)據(jù)），為后續(xù)研究提供準(zhǔn)確可靠的組織質(zhì)量依據(jù)。

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