一、實(shí)驗(yàn)原理
小鼠轉(zhuǎn)棒疲勞儀通過驅(qū)動轉(zhuǎn)棒旋轉(zhuǎn),迫使小鼠在棒上持續(xù)運(yùn)動以保持平衡。當(dāng)轉(zhuǎn)棒以恒定速度、加速或變速模式運(yùn)行時(shí),小鼠需通過肢體協(xié)調(diào)和運(yùn)動調(diào)整避免跌落。儀器記錄其跌落時(shí)間、速度等參數(shù),反映運(yùn)動耐力、平衡能力及神經(jīng)肌肉協(xié)調(diào)性,常用于評估藥物作用(如抗疲勞、肌松劑效應(yīng))或疾病模型(如帕金森病、老年癡呆)的運(yùn)動功能障礙。
二、實(shí)驗(yàn)裝置
轉(zhuǎn)軸:表面粗糙以增加摩擦力,分多通道獨(dú)立測試。
電機(jī)與控制系統(tǒng):支持勻速、勻加速、變速、多階及旋轉(zhuǎn)模式,轉(zhuǎn)速范圍0-60 rpm
紅外傳感器:實(shí)時(shí)檢測小鼠跌落,記錄跌落時(shí)間、速度及方向。
控制面板與顯示屏:用于參數(shù)設(shè)置、模式選擇及數(shù)據(jù)查看。
底部托盤:承接跌落小鼠,內(nèi)置傳感器防止糞便干擾檢測。
三、實(shí)驗(yàn)流程
3.1 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備(第1天)
環(huán)境適應(yīng):
將小鼠轉(zhuǎn)移至實(shí)驗(yàn)房間,適應(yīng)環(huán)境光照(建議50-100 lux)、溫度(22-25℃)和濕度(40-60%)至少12小時(shí),減少應(yīng)激反應(yīng)。
分組標(biāo)記:
根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)分組(如對照組、模型組、給藥組),用無毒記號筆或耳標(biāo)標(biāo)記小鼠,記錄體重、健康狀況。
3.2 預(yù)實(shí)驗(yàn)與適應(yīng)訓(xùn)練(第2-4天)
第2天:初次接觸轉(zhuǎn)棒(低速適應(yīng))
模式選擇:勻速模式,轉(zhuǎn)速設(shè)為4-6 rpm(低速)。
操作步驟:
將小鼠輕放于靜止轉(zhuǎn)棒上,啟動設(shè)備至設(shè)定轉(zhuǎn)速。
每只小鼠訓(xùn)練3次,每次60秒,間隔5分鐘(避免疲勞)。
記錄小鼠首次跌落時(shí)間,剔除無法站立超過5秒的個(gè)體(可能存在運(yùn)動缺陷)。
清理:每次訓(xùn)練后清理托盤糞便,避免傳感器遮擋。
第3天:中速適應(yīng)訓(xùn)練
模式選擇:勻速模式,轉(zhuǎn)速提升至8-10 rpm。
操作步驟:
每只小鼠訓(xùn)練3次,每次90秒,間隔10分鐘。
觀察小鼠是否主動調(diào)整步伐跟隨轉(zhuǎn)棒,剔除頻繁滑落(>3次/分鐘)個(gè)體。
第4天:加速模式適應(yīng)
模式選擇:勻加速模式,起始速度6 rpm,目標(biāo)速度12 rpm,加速度時(shí)間30秒。
操作步驟:
每只小鼠訓(xùn)練2次,每次持續(xù)至跌落或最長2分鐘,間隔15分鐘。
記錄跌落時(shí)的速度和訓(xùn)練時(shí)間,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)參數(shù)調(diào)整。
3.3 正式實(shí)驗(yàn)(第5天)
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
禁食2小時(shí)(避免飽腹影響運(yùn)動能力),自由飲水。
參數(shù)設(shè)置:
根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果選擇模式(例如勻加速模式:起始速度6 rpm→目標(biāo)速度40 rpm,加速度時(shí)間300秒,總時(shí)長10分鐘)。
確認(rèn)實(shí)驗(yàn)時(shí)間單位為分鐘,加速度單位為秒。
實(shí)驗(yàn)操作:
啟動轉(zhuǎn)棒至起始速度(6 rpm),依次放入小鼠,確保其穩(wěn)定站立≥2秒后點(diǎn)擊“Run”開始計(jì)時(shí)。
實(shí)驗(yàn)員需全程觀察,記錄以下情況:
小鼠是否出現(xiàn)被動懸掛(四肢緊抱轉(zhuǎn)棒不移動)或反向奔跑,此類行為需標(biāo)記并在數(shù)據(jù)分析時(shí)排除。
跌落瞬間的實(shí)時(shí)速度及方向(儀器自動記錄)。
四、測試指標(biāo)
潛伏期:小鼠從實(shí)驗(yàn)開始至跌落的持續(xù)時(shí)間(秒),反映運(yùn)動耐力與抗疲勞能力。
跌落速度:轉(zhuǎn)棒在跌落瞬間的實(shí)時(shí)轉(zhuǎn)速(rpm),評估小鼠對速度變化的耐受極限。
運(yùn)動距離:根據(jù)轉(zhuǎn)速與潛伏期計(jì)算小鼠在棒上的總移動距離(米)。
方向適應(yīng)性:變速或旋轉(zhuǎn)模式中,記錄小鼠在順時(shí)針/逆時(shí)針轉(zhuǎn)向時(shí)的跌落差異。
階段參數(shù):多階模式中分階段記錄數(shù)據(jù),分析小鼠對不同強(qiáng)度運(yùn)動的響應(yīng)規(guī)律。