一、檢測原理

本試劑盒是利用競爭ELISA方法，在酶標(biāo)板微孔上預(yù)包被抗 硝基咪唑抗原。檢測時，加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液，硝基咪唑抗體及酶標(biāo)記物，包被抗原和加入樣本中的硝基咪唑競爭性地與硝基咪唑抗體結(jié)合后，再與酶標(biāo)記物形成抗原抗體復(fù)合物，用TMB底物顯色；加入反應(yīng)終止液，在450nm波長酶標(biāo)儀下進(jìn)行檢測，樣品中的硝基咪唑濃度與吸收光強(qiáng)度成反比。

二、檢測范圍

本試劑盒是應(yīng)用ELISA技術(shù)研發(fā)的藥物殘留檢測產(chǎn)品,與儀器分析技術(shù)比較，能經(jīng)濟(jì)、快速地檢測出蜂蜜中的硝基咪唑類藥物。

三、交叉反應(yīng)率

與類似物的交叉反應(yīng)率：

甲硝唑(MNZ) ………………………………………100%

二甲硝咪唑DMZ…………………………………… 168%

洛硝唑(RNZ) ………………………………………112%

異丙硝唑……………………………………………33%

四、試劑盒組成

酶標(biāo)板1塊，96孔/板

標(biāo)準(zhǔn)液6瓶（1ml/瓶）：

0 ppb、0.05ppb、0.2ppb、0.8ppb、3.2ppb、12.8ppb

抗體工作液 ………………………7ml

酶標(biāo)記物 ……………………… 12ml

底物液A …………………………7ml

底物液B …………………………7ml

終止液   …………………………7ml

20X濃縮洗滌液  ………………40 ml

2X濃縮復(fù)溶液   ………………50 ml

說明書 ……………………………1份

樣本處理步驟：

 (A)蜂蜜（樣本稀釋倍數(shù)0.5）

（1）取3g蜂蜜，加3ml 0.1M 碳酸鹽緩沖溶液振蕩至蜂蜜全部溶解；

（2）加入9ml 二氯甲烷，振蕩5分鐘，室溫4000轉(zhuǎn)/分，離心5分鐘；

（3）去除上層雜質(zhì)，取下層有機(jī)相6ml至另一離心管中，加入2ml二氯甲烷，2ml 2M氫氧化鈉溶液，室溫4000轉(zhuǎn)/分，離心5分鐘；

（4）取4ml清澈下層有機(jī)相至干燥溶器中，50℃水浴氮氣吹干；

（5）用0.5ml復(fù)溶工作液溶解干燥的殘留物，再加入正己烷1ml混合30秒，室溫3000轉(zhuǎn)/分以上，離心5分鐘；

（6）去除上層取下層50µl液體用于分析。