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振動(dòng)切片方法及與石蠟、冰凍切片的比較

瀏覽次數(shù):7428 發(fā)布日期:2013-12-27  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
振動(dòng)切片用振動(dòng)切片機(jī),可以把新鮮組織(不固定不冰凍)切成厚片20~10μm,以漂浮法在反應(yīng)板進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色,然后在解剖顯微鏡下檢出免疫反應(yīng)陽(yáng)性部位,修整組織進(jìn)行后固定,最后按電鏡樣品制備、脫水、包埋、超薄切片、染色觀察等。組織不冰凍,無(wú)冰晶形成和組織抗原破壞,在免疫組化染色前避免了組織脫水、透明、包埋等步驟對(duì)抗原的損害,能較好地保留組織內(nèi)脂溶性物質(zhì)和細(xì)胞膜抗原,主要用于顯示神經(jīng)系統(tǒng)抗原分布研究。醫(yī)學(xué)教育`網(wǎng)搜集整理這種包埋前染色,尤其適用于免疫電鏡觀察。
 
振動(dòng)切片方法是利用刀片振動(dòng)原理,用來(lái)將新鮮的活體組織或固定過(guò)的組織切成20微米的薄片到1毫米以上厚片的儀器。一般厚度精度控制大約為1微米,如果做熒光染色建議切成薄片。

對(duì)于成年小鼠或胚胎腦部、脊髓、肝臟、眼睛及其他器官組織,我們的方法是用低熔點(diǎn)瓊脂糖包埋,然后將封裝在瓊脂糖里的組織進(jìn)行切片,取下的組織厚片可以浸泡在如六孔板內(nèi)進(jìn)行組織化學(xué)或免疫組織化學(xué)染色。然后,用激光掃描共聚焦顯微鏡或雙光子顯微鏡等進(jìn)行觀察。而對(duì)于或新鮮活體組織則不需要包埋,直接固定在切片槽中切片。

與石蠟切片、冰凍切片方法比較:
振動(dòng)切片方法簡(jiǎn)單、快速,能使組織比較完整保留,適合做或組織電生理學(xué)等研究。與冰凍切片相比,不需要對(duì)組織冷凍,不會(huì)形成冰晶或造成組織抗原的破壞。與石蠟切片相比,不需要脫水、透明、浸蠟等過(guò)程,避免對(duì)抗原的損害。

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