結(jié)合了實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)靈敏可靠的優(yōu)勢(shì)以及現(xiàn)下最熱的微列陣技術(shù)；

 

檢測(cè)多種基因表達(dá)量，是分析信號(hào)通路或某生物學(xué)功能相關(guān)基因表達(dá)狀態(tài)的首選工具；

 

完全克服了常規(guī)雜交芯片假陽性率高的缺陷；

 

完全克服了常規(guī)雜交芯片海量數(shù)據(jù)難于有效分析的缺陷，使用方便，只要有定量PCR儀就可以進(jìn)行該實(shí)驗(yàn)；

 

其應(yīng)用領(lǐng)域十分廣泛，主要有腫瘤、免疫、發(fā)育、代謝、干細(xì)胞、細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)胞信號(hào)通路、心血管疾病、miRNA靶基因等。

 

相比于PCR array技術(shù)，表達(dá)譜芯片和轉(zhuǎn)錄組測(cè)序可以實(shí)現(xiàn)全基因組水平的檢測(cè)，但只能了解一些常見的研究物種中不同表型或者疾病類型間，有哪些基因發(fā)生了基因表達(dá)的變化。這兩項(xiàng)技術(shù)進(jìn)行基因篩選后，都需要經(jīng)過驗(yàn)證。如果只檢測(cè)的是幾個(gè)特定的基因，qPCR技術(shù)是大家會(huì)普遍采用的。

 

qPCR技術(shù)雖然比較成熟，但是在實(shí)際研究中也有許多需要注意的事項(xiàng)，比如內(nèi)參的選擇是否合適，體系的優(yōu)化以及引物設(shè)計(jì)等等，都會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果有很大的影響。因此，針對(duì)一些有候選通路或者基因的研究，這些研究中所關(guān)注的基因比較多，這個(gè)時(shí)候可以考慮結(jié)合定制PCR array技術(shù)進(jìn)行相應(yīng)的研究，可以實(shí)現(xiàn)批量基因的驗(yàn)證。

 

BioTNT 同時(shí)提供自產(chǎn)QPCR Array 產(chǎn)品，并提供定制QPCR Array 產(chǎn)品。傳統(tǒng)的定制PCR array產(chǎn)品只能檢測(cè)定制的一些基因，如果客戶不需要檢測(cè)這么多基因或者還需要檢測(cè)定制以外的其它基因，我們可以根據(jù)客戶的實(shí)際所需的基因數(shù)，為客戶設(shè)計(jì)其所需的特定的BioTNT 自產(chǎn)QPCR Array 產(chǎn)品。

 

 

能根據(jù)客戶的實(shí)際要求，定制自產(chǎn)的QPCR Array 產(chǎn)品

 

對(duì)樣本質(zhì)量進(jìn)行嚴(yán)格的把控，對(duì)客戶所提供的樣本進(jìn)行RNA 抽提后，我們都會(huì)采用NanoDrop測(cè)定RNA濃度，OD比值（260nm和280nm處的OD值），并評(píng)測(cè)RNA質(zhì)量。質(zhì)量符合要求的才會(huì)進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)前還會(huì)對(duì)CDNA 選測(cè)內(nèi)參基因進(jìn)行第二次質(zhì)檢；兩次質(zhì)檢全部合格后，進(jìn)行正式QPCR Array 實(shí)驗(yàn)；這樣能避免因樣本不合格而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)所造成的損失。

 

引物自己設(shè)計(jì)，驗(yàn)證，篩選，對(duì)于客戶所需的每個(gè)基因，我們都會(huì)設(shè)計(jì)兩對(duì)引物，用我們自己的陽性模板驗(yàn)證，然后從中篩選中較優(yōu)的引物作為客戶正式實(shí)驗(yàn)的引物。

 

利用儀器配套軟件計(jì)算PCR芯片中的每個(gè)基因的Ct值。按照BioTNT QPCR Array 分析軟件，分別copy test sample和control sample 的CT值到excel 表中。根據(jù)excel 表軟件，計(jì)算是否符合質(zhì)量控制，選擇內(nèi)參基因來計(jì)算每個(gè)基因的表達(dá)上調(diào)或者下調(diào)的情況，為客戶篩選出有價(jià)值的基因。