DNA甲基化研究的三大前期探索性實驗思路介紹
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近些年以來，DNA甲基化研究一直是頂級期刊、基金資助、臨床研究、藥物研發(fā)上市的多重熱點，其研究方向涵蓋疾病發(fā)生發(fā)展、疾病標志物研究、環(huán)境因素暴露與響應、發(fā)育和分化等多維度。
研究人員為DNA甲基化課題申請作準備以及為降低DNA甲基化實驗風險，通常會進行DNA甲基化研究的前期探索性實驗，主要包括：
一、檢測DNA甲基化酶和去甲基化酶的表達
方法包括：
e.g. 高脂飲食組和肥胖人群中均觀察到DNMT的RNA和蛋白質表達上調
二、檢測整體DNA甲基化水平變化
方法包括：
² 5mC甲基化免疫熒光染色（定性）
² DNA斑點雜交（定性）
² 比色法（定量）
² 質譜法（定量）
三、其他前期實驗
在沒有條件開展甲基化相關前期實驗的情況下，也可以開展其他預實驗。包括：
² 關鍵表型指標測定
² 轉錄組（成本低廉）
在進行前期探索性實驗后，DNA甲基化的研究思路與項目設計還包括：技術選擇、數(shù)據(jù)挖掘、下游驗證。
近些年以來，DNA甲基化研究一直是頂級期刊、基金資助、臨床研究、藥物研發(fā)上市的多重熱點，其研究方向涵蓋疾病發(fā)生發(fā)展、疾病標志物研究、環(huán)境因素暴露與響應、發(fā)育和分化等多維度。
研究人員為DNA甲基化課題申請作準備以及為降低DNA甲基化實驗風險，通常會進行DNA甲基化研究的前期探索性實驗，主要包括：
- 檢測DNA甲基化酶和去甲基化酶的表達
- 檢測整體DNA甲基化水平變化
- 其他前期實驗
一、檢測DNA甲基化酶和去甲基化酶的表達
方法包括：
- RT-qPCR檢測mRNA表達
- Western blot檢測蛋白質翻譯
e.g. 高脂飲食組和肥胖人群中均觀察到DNMT的RNA和蛋白質表達上調
二、檢測整體DNA甲基化水平變化
方法包括：
² 5mC甲基化免疫熒光染色（定性）
² DNA斑點雜交（定性）
² 比色法（定量）
² 質譜法（定量）
斑點雜交（Dot blot）
免疫熒光顯微觀察
比色法/質譜法
三、其他前期實驗
在沒有條件開展甲基化相關前期實驗的情況下，也可以開展其他預實驗。包括：
² 關鍵表型指標測定
² 轉錄組（成本低廉）
在進行前期探索性實驗后，DNA甲基化的研究思路與項目設計還包括：技術選擇、數(shù)據(jù)挖掘、下游驗證。
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