熒光素酶檢測進階：6重熒光素酶分析使用教程

瀏覽次數(shù)：1691　發(fā)布日期：2023-9-5　來源：本站　僅供參考，謝絕轉(zhuǎn)載，否則責任自負

我們做過熒光素酶報告基因檢測，做過雙報告基因檢測，那 6 重報告基因檢測排上日程了嗎？他來了他來了，BMG LABTECH 帶著 CLARIOstar PLUS 多功能酶標儀來了。CLARIOstar PLUS 光譜掃描功能幫助從 12 個熒光素酶中找到 6 個適合多重熒光素酶分析，能夠探測 5 個細胞內(nèi)信號反應和一個標準化對照。

首先，我們使用 CLARIOstar PLUS 發(fā)光光譜掃描功能對 12 種熒光素酶進行了表征，以確定光譜分辨多重信號的能力。圖 2 顯示了 6 種 D-LUC-（左）和 6 種 CLZN 為底物熒光素酶（右）的結(jié)果。

然后，根據(jù)光譜數(shù)據(jù)以及底物特異性和淬滅能力的結(jié)果，挑選出 6 種熒光素酶進行進一步測試。

最后，我們進行了驗證測試，檢測經(jīng)驗證的 siRNA 方法敲除多重螢光素酶測定的單一成分的直接和間接影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)除了靶基因敲除外，還可以觀察到對其他成分表達的明顯影響。

CLARIOstar PLUS 自帶的 LVF 線性漸變?yōu)V光片光柵，不僅可以進行熒光光譜掃描，還具備獨有的化學發(fā)光光譜掃描能力，是開發(fā)這種多重熒光素酶檢測的理想工具。使用發(fā)光光譜掃描，可以對多種熒光素酶進行表征，以找到可以相互區(qū)分的組別。多色發(fā)射濾光片和試劑注射器的結(jié)合使用，幫助建立了一個完整的 6 重熒光素酶檢測系統(tǒng)。6 重熒光素酶檢測能極大地擴展了我們評估 siRNA、配體和化合物處理效果的能力，提供全面理解復雜生物系統(tǒng)所需的豐富數(shù)據(jù)。

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