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DNA定量方法對(duì)比:分光光度法與熒光染色法

瀏覽次數(shù):1758 發(fā)布日期:2023-9-5  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

無論您想通過qPCR分析基因表達(dá),還是通過下一代測序探索遺傳易感性,準(zhǔn)確定量DNA都是分子生物學(xué)研究的重要一環(huán)。

隨著檢測方法的多樣化,如何選擇成為難點(diǎn)。比較常用的有基于吸光度的方法,以及各種基于熒光的DNA定量方法。

 

通常來講,熒光染色法更具特異性,并且能夠檢測更低濃度的DNA樣本。但即使在基于熒光的方法中,不同試劑盒適用的檢測濃度范圍也存在差異。

 

為此,我們使用BMG LABTECH的FLUOstar®Omega、VANTAstar®和CLARIOstar®Plus酶標(biāo)儀,配合不同規(guī)格的微孔板,對(duì)三種常用的熒光定量試劑盒(Qubit™ dsDNA BR、Qubit™ dsDNA HS和Quant-iT™ Picogreen™) 以及基于吸光度的DNA定量進(jìn)行比較。

 

具體實(shí)驗(yàn)步驟見我們的應(yīng)用指南:DNA quantification using absorbance (A260) and fluorescent methods (Qubit™ and Quant-iT™/PicoGreen™)

 

我們根據(jù)檢測結(jié)果計(jì)算出三種試劑盒與分光光度法的檢測限,結(jié)果如下圖所示。

 

可以看出,BMG LABTECH多功能酶標(biāo)儀與常用的DNA定量方法兼容,是檢測雙鏈DNA的可靠儀器,適用DNA樣品濃度范圍較廣,可低至每孔0.8pg。
 

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