• 疫苗株篩選：通過(guò)遺傳減毒策略快速構(gòu)建篩選體系；
• 疫苗株粘膜免疫研究：通過(guò)增強(qiáng)黏膜免疫反應(yīng)來(lái)提高疫苗的廣譜保護(hù)效果；
• 疫苗免疫效果評(píng)價(jià)：科學(xué)團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)攜帶 BA.1 和 BA.5 刺突的減毒病毒能增強(qiáng)針對(duì)特定變異體的中和抗體水平
• 疫苗安全性評(píng)價(jià)：發(fā)現(xiàn) Nsp1-K164A/H165A 通過(guò)空氣傳播的效率低于野生型 SARS-CoV-2，且傳播后未導(dǎo)致哨兵倉(cāng)鼠體重下降。

在這些研究工作中，Cytation7 重點(diǎn)承擔(dān)了基于熒光斑點(diǎn)計(jì)數(shù)的病毒滴度檢測(cè)、基于免疫熒光成像法的中和抗體檢測(cè)以及 INF-γ 的 ELISpot 測(cè)定 。

上圖：敘利亞倉(cāng)鼠經(jīng) Delta 和 Omicron 變體攻擊后，用 100 PFU Nsp1-K164A/H165A 鼻內(nèi)免疫可顯著降低上呼吸道和下呼吸道的病毒載量，其中病毒滴度評(píng)價(jià)使用 Cytation7 的熒光斑點(diǎn)計(jì)數(shù)法。

上圖：Nsp1-K164A/H165A 鼻內(nèi)免疫誘導(dǎo)粘膜和全身體液免疫和細(xì)胞免疫
敘利亞倉(cāng)鼠鼻內(nèi)接種減毒疫苗，在 14 和 28 DPI 時(shí)對(duì)動(dòng)物放血以收集血清，和支氣管肺泡灌洗液 (BALF)。
采用 ELISA 方法檢測(cè)血清種抗 RBD IgAhe IgG 的濃度。
Cytation7 免疫熒光斑點(diǎn)檢測(cè)計(jì)算 FRNT50 評(píng)價(jià)中和抗體
Cytation7 頂部成像 ELISpot 法計(jì)算分泌 IFNγ 的細(xì)胞數(shù)。

案例 2：納米疫苗與腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞協(xié)同靶向 PD-1 實(shí)體瘤免疫療法

本研究來(lái)源于特拉維夫大學(xué)薩戈?duì)柹窠?jīng)科學(xué)學(xué)院生理學(xué)和藥理學(xué)系和里斯本大學(xué)生物納米材料學(xué)系。研究團(tuán)隊(duì)設(shè)計(jì)了基于多功能納米粒子的納米疫苗，通過(guò)聚惡唑啉（POx）-聚乳酸-乙醇酸（PLGA）共同遞送肽抗原和 TGF-β 表達(dá)調(diào)節(jié)劑，并發(fā)現(xiàn)其能夠調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境內(nèi) TAM 功能并阻斷 PD-1，可作為癌癥免疫療法的替代方法。

研究者還發(fā)現(xiàn) POx- 甘露糖（Man）納米疫苗能產(chǎn)生抗原特異性 T 細(xì)胞反應(yīng)，比 PEG-Man 納米疫苗更有效控制腫瘤生長(zhǎng)，因此，本研究結(jié)果體現(xiàn)了納米疫苗與 TAM 和 PD-1 誘導(dǎo)免疫抑制結(jié)合療法有改善實(shí)體癌患者免疫治療效果的巨大潛力。

在以上研究工作中，Cytation7 主要承擔(dān)了抗原特異性 T 細(xì)胞功能評(píng)估的 ELISpot 實(shí)驗(yàn)。

抗原特異性T細(xì)胞功能評(píng)估：給藥第 19 天，C57BL/6J 小鼠被安樂(lè)死，收獲脾臟并分離出脾細(xì)胞進(jìn)行 IFN-γ ELISpot 檢測(cè)。使用 Cytation7 自動(dòng)拍照并定量分析。
研究結(jié)果確認(rèn)了接受 Nanovaccine_siTGF-β1 + 佩西達(dá)利單抗治療的小鼠脾細(xì)胞在 MHCI/MHCII-Adpgk 表位肽刺激后產(chǎn)生的針對(duì) Adpgk 的特異性 T 細(xì)胞反應(yīng)

案例 3：鼻內(nèi)納米顆粒疫苗對(duì)結(jié)核分枝桿菌的保護(hù)性免疫

黏膜疫苗能在呼吸道病原體的進(jìn)入點(diǎn)引發(fā)保護(hù)性免疫反應(yīng)，防止初始感染，來(lái)自美國(guó)休斯敦大學(xué)化學(xué)與生物分子工程系的研究團(tuán)隊(duì)開(kāi)發(fā)了一種基于環(huán)鳥(niǎo)苷酸腺苷酸（cGAMP）的脂質(zhì)體配方 NanoSTING 作為黏膜佐劑，研究表明 NanoSTING 能夠有效啟動(dòng)多因素黏膜免疫反應(yīng)，為黏膜疫苗的研發(fā)提供了新方向。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，使用 NanoSTING 作為佐劑的 H1 抗原疫苗，在鼻內(nèi)接種后能夠引發(fā)強(qiáng)烈的 T 細(xì)胞反應(yīng)，包括關(guān)鍵的肺駐留T細(xì)胞、分泌 IFNγ的CD4+ T 細(xì)胞和分泌 IL17的CD4+ T 細(xì)胞，提供與皮下接種 BCG 疫苗相當(dāng)?shù)拿庖弑Ｗo(hù)，證明了該策略在預(yù)防結(jié)核分枝桿菌感染方面的有效性。

研究團(tuán)隊(duì)采用 Cytation7 開(kāi)展了 NanoSTING 鼻內(nèi)給藥后引發(fā)的抗原特異性T細(xì)胞功能評(píng)估。

鼻內(nèi)給予 NanoSTING-H1 可在接種動(dòng)物的肺和脾臟中引發(fā)針對(duì)多種抗原的強(qiáng)烈 T 細(xì)胞反應(yīng)。其中 INF-γ 分泌采用基于 Cytation7 正置成像系統(tǒng)的自動(dòng)化 ELISpot 方案

Cytation7 在新型疫苗開(kāi)發(fā)中的多模式應(yīng)用

在“后疫情時(shí)代”，疫苗研發(fā)已進(jìn)入精準(zhǔn)化、高效化賽道。安捷倫 Cytation7 憑借正倒置一體設(shè)計(jì)、全自動(dòng)高通量成像、多場(chǎng)景適配性，不僅解決了傳統(tǒng)設(shè)備的碎片化難題，更通過(guò)智能化分析為疫苗效果評(píng)價(jià)樹(shù)立新標(biāo)桿。無(wú)論是應(yīng)對(duì)突發(fā)傳染病，還是攻克癌癥治療難關(guān)，Cytation7 都將成為科學(xué)家手中不可或缺的“利器”。 

參考文獻(xiàn)
Acurcio, R. C. and R. Kleiner, et al. (2024). "Intranasal Multiepitope PD-L1-siRNA-Based Nanovaccine: The Next-Gen COVID-19  Immunotherapy." Adv Sci (Weinh) 11 (40): e2404159.

Sefat, K. and M. Kumar, et al. (2024). "An intranasal nanoparticle vaccine elicits protective immunity against  Mycobacterium tuberculosis." Vaccine 42 (22): 125909.

Stauft, C. B. and P. Selvaraj, et al. (2023). "Intranasal or airborne transmission-mediated delivery of an attenuated SARS-CoV-2  protects Syrian hamsters against new variants." Nat Commun 14 (1): 3393.

相關(guān)產(chǎn)品：
Cytation 7 細(xì)胞成像多功能微孔板檢測(cè)系統(tǒng)