研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤微環(huán)境中抗炎表型巨噬細(xì)胞與自然殺傷細(xì)胞及T細(xì)胞之間呈現(xiàn)顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系，且腫瘤內(nèi)部自然殺傷細(xì)胞的細(xì)胞毒性功能明顯減弱。盡管LUAD與LUSC在主要細(xì)胞類(lèi)型組成上較為相似，但在多種免疫檢查點(diǎn)分子共表達(dá)模式方面存在顯著差異。此外，研究進(jìn)一步揭示了腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)錄重編程的證據(jù)，表現(xiàn)為其向膽固醇輸出表型轉(zhuǎn)化，并呈現(xiàn)出與胎兒發(fā)育階段相似的鐵離子外排相關(guān)轉(zhuǎn)錄特征。

本研究構(gòu)建的多組學(xué)數(shù)據(jù)資源，為深入解析腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞的高分辨率分子圖譜提供了重要基礎(chǔ)，進(jìn)一步闡明了其在腫瘤微環(huán)境中的功能調(diào)控機(jī)制，并為針對(duì)腫瘤免疫微環(huán)境的新型治療策略開(kāi)發(fā)提供了理論依據(jù)。

通過(guò)流式分選技術(shù)富集CD45⁺免疫細(xì)胞，并去除紅細(xì)胞以保留非免疫細(xì)胞群體，進(jìn)而完成單細(xì)胞RNA測(cè)序。此外，從上述隊(duì)列中選取8例患者（涵蓋腫瘤與癌旁組織）制作組織切片，采用10x Genomics Visium平臺(tái)進(jìn)行空間轉(zhuǎn)錄組分析，共計(jì)獲得36張有效切片數(shù)據(jù)。經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制與標(biāo)準(zhǔn)化分析流程，最終建立了包含近90萬(wàn)個(gè)高質(zhì)量細(xì)胞的單細(xì)胞及空間轉(zhuǎn)錄組整合圖譜。

通過(guò)對(duì)主要細(xì)胞類(lèi)群進(jìn)行亞聚類(lèi)分析，共鑒定出46種細(xì)胞亞型，并揭示了關(guān)鍵功能群體的變化：腫瘤組織中低細(xì)胞毒性表型的自然殺傷細(xì)胞比例升高；調(diào)節(jié)性T細(xì)胞明顯積累，而耗竭型細(xì)胞毒性T細(xì)胞比例下降；腫瘤內(nèi)高度異質(zhì)性的抗炎型巨噬細(xì)胞比例上升。值得注意的是，其中一類(lèi)具有循環(huán)特征的STAB1⁺巨噬細(xì)胞亞群的比例，與T細(xì)胞及自然殺傷細(xì)胞的頻率呈顯著負(fù)相關(guān)，提示其在抑制細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)中的關(guān)鍵作用。此外，在腫瘤組織中成功鑒定出一類(lèi)同時(shí)表達(dá)髓系與上皮標(biāo)志的“癌癥相關(guān)巨噬細(xì)胞樣細(xì)胞”，其獨(dú)特轉(zhuǎn)錄譜并非由技術(shù)偽影所致。

此外，研究揭示了亞型特異的促血管生成信號(hào)（VEGF通路受體在LUAD成纖維細(xì)胞中高表達(dá)）與上皮生長(zhǎng)信號(hào)（EGFR配體通路在LUSC中更活躍）的差異。同時(shí)，識(shí)別出多個(gè)與三級(jí)淋巴結(jié)構(gòu)形成相關(guān)的共刺激信號(hào)分子對(duì)，為理解患者預(yù)后差異提供了線索。這些發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)闡明了兩種肺癌亞型在微環(huán)境通信網(wǎng)絡(luò)層面的異同，為開(kāi)發(fā)精準(zhǔn)免疫治療策略提供了新的分子依據(jù)。

綜上所述，本研究構(gòu)建的多組學(xué)資源，不僅深化了對(duì)非小細(xì)胞肺癌免疫微環(huán)境異質(zhì)性與免疫抑制機(jī)制的理解，也為基于腫瘤亞型及微環(huán)境特征設(shè)計(jì)下一代免疫聯(lián)合療法提供了關(guān)鍵的數(shù)據(jù)支持和理論框架。

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