基于此，研究團(tuán)隊將目光投向酵母表達(dá)系統(tǒng)：一方面，酵母自身的 β- 葡聚糖可作為天然安全佐劑；另一方面，真核酵母能實現(xiàn)抗原的糖基化修飾，更接近天然病毒抗原的結(jié)構(gòu)。團(tuán)隊創(chuàng)新性地設(shè)計了 “抗原錨定” 和 “抗原分泌” 兩種酵母疫苗模式，以 SARS-CoV-2 的 RBD 為模型抗原，探索最優(yōu)的黏膜免疫激活策略。

1. 疫苗構(gòu)建：以畢赤酵母為載體，分別構(gòu)建膜錨定型（YVm）和分泌型（YVs） RBD 酵母疫苗。YVm 通過 GPI 錨定將 RBD 展示于酵母表面，YVs 則通過信號肽實現(xiàn) RBD 分泌。
   
2. 體外特性驗證：檢測疫苗的 RBD 表達(dá)、糖基化修飾、胃腸道穩(wěn)定性及樹突狀細(xì)胞（DC）激活能力。
3. 體內(nèi)分布追蹤：通過 DiD 標(biāo)記追蹤疫苗在小鼠腸道、派氏結(jié)（PP）及腸系膜淋巴結(jié)（MLN）的定植與細(xì)胞攝取情況。
4. 免疫效應(yīng)評估：檢測疫苗誘導(dǎo)的 RBD 特異性 IgA/IgG 抗體水平及假病毒中和能力。
5. 機(jī)制解析：通過單細(xì)胞測序和轉(zhuǎn)錄組分析，闡明疫苗激活 DC-Tfh-B 細(xì)胞互作的免疫機(jī)制。
6. 競品對比：將酵母疫苗與細(xì)菌錨定疫苗（BVm）、細(xì)胞膜仿生納米疫苗（CNV）對比，驗證其免疫優(yōu)勢。

1. 作為免疫印跡陽性對照：在驗證 YVm 和 YVs 的 RBD 表達(dá)實驗中，研究團(tuán)隊使用 50ng Absin RBD 蛋白作為陽性對照，精準(zhǔn)判定酵母疫苗中 RBD 的表達(dá)效率及分子量（對應(yīng)原文圖 2B）。
   
2. 校準(zhǔn)抗原活性檢測體系：在驗證 RBD 與 ACE2 的結(jié)合活性、模擬胃腸液中 RBD 穩(wěn)定性等實驗中，Absin RBD 蛋白作為標(biāo)準(zhǔn)品，確保了實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可比性。

Absin 重組 RBD 蛋白憑借高純度、高活性的產(chǎn)品特性，為研究中疫苗抗原的表達(dá)驗證和活性評估提供了可靠的原料保障，助力科研團(tuán)隊高效完成核心實驗環(huán)節(jié)。

本文內(nèi)容基于《ACS Nano》（DOI: 10.1021/acsnano.4c14690）原文獻(xiàn)；文中涉及的原文獻(xiàn)圖片、數(shù)據(jù)等知識產(chǎn)權(quán)歸原期刊及研究團(tuán)隊所有。若存在侵權(quán)情形，敬請及時聯(lián)系我方刪除，我方將積極配合處理。