流式細(xì)胞術(shù)樣本制備從PBMC到組織解離標(biāo)準(zhǔn)化方案
瀏覽次數(shù):191 發(fā)布日期:2026-4-1
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做流式細(xì)胞術(shù)實驗,樣本制備是絕對的第一步,也是最關(guān)鍵的一步!很多人實驗結(jié)果差、細(xì)胞分群不清晰、分選純度低,追根溯源,都是樣本制備環(huán)節(jié)出了問題。
一、流式樣本制備的核心流程:從取材到上機的完整鏈路
不管是血液樣本還是組織樣本,流式實驗的樣本制備都遵循一套標(biāo)準(zhǔn)化的核心流程,每個環(huán)節(jié)環(huán)環(huán)相扣,直接影響最終實驗結(jié)果:
1,取材:從實驗動物或人體獲取新鮮的血液、組織等樣本
2,單細(xì)胞懸液制備:將樣本處理成單個細(xì)胞的懸液(流式實驗的基礎(chǔ),必須保證細(xì)胞分散、無團塊)
3,磁珠孵育:用特異性磁珠標(biāo)記目標(biāo)細(xì)胞,為后續(xù)細(xì)胞分選做準(zhǔn)備
4,潤洗分選柱:預(yù)處理分選柱,保證細(xì)胞分選的效率和純度
5,上樣:將處理好的細(xì)胞懸液加入分選柱
6,吸附、洗脫:讓目標(biāo)細(xì)胞結(jié)合在分選柱上,洗去雜細(xì)胞,再洗脫得到高純度的目標(biāo)細(xì)胞
7,流式鑒定:用流式細(xì)胞儀驗證分選后細(xì)胞的純度和活性
8,細(xì)胞培養(yǎng):將純化后的細(xì)胞進行后續(xù)的培養(yǎng)、功能實驗等
二、外周血樣本制備:PBMC 分離的標(biāo)準(zhǔn)化方案
外周血是免疫實驗、流式檢測最常用的樣本類型,我們常說的PBMC(外周血單個核細(xì)胞),是從外周血中分離得到的淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞等的統(tǒng)稱,是絕大多數(shù)流式免疫實驗的核心樣本。
1. PBMC 分離金標(biāo)準(zhǔn):Ficoll 外周血淋巴細(xì)胞分離液
分離 PBMC 的經(jīng)典方法是密度梯度離心法,核心試劑就是 Ficoll 分離液(產(chǎn)品編號:abs930)。
這款試劑是行業(yè)公認(rèn)的金標(biāo)準(zhǔn),引用文獻超過 200 篇,可靠性拉滿!利用不同細(xì)胞的密度差異,離心后血液自然分層,輕松提取高純度、高活性的 PBMC,規(guī)格有 200ml/2000ml 可選,滿足從小試到大規(guī)模實驗的不同需求。
2. 樣本保存解決方案:外周血保存液
如果遇到樣本不能及時處理、需要長途運輸?shù)那闆r,外周血保存液(abs90134)就是你的救星!
用它可以讓全血在 2-8℃環(huán)境下保存 7-15 天,最大程度維持細(xì)胞活性,避免樣本浪費,完美解決樣本延遲處理的痛點。
三、組織樣本制備:從組織塊到單細(xì)胞懸液的 7 步標(biāo)準(zhǔn)化流程
做組織樣本的流式實驗,最大的難點就是把組織塊處理成合格的單細(xì)胞懸液:消化不足會有細(xì)胞團,堵塞流式管路;消化過度會導(dǎo)致細(xì)胞大量死亡,直接影響實驗結(jié)果。
優(yōu)寧維為大家整理了標(biāo)準(zhǔn)化的組織樣本單細(xì)胞懸液處理流程,7 步輕松搞定:
1,樣本取材:無菌條件下快速獲取目標(biāo)組織,保證樣本新鮮
2,組織保存:若無法及時處理,用合適的保存液維持細(xì)胞活性
3,機械 + 酶消化:用機械剪切配合特異性酶消化,將組織塊分解為單個細(xì)胞(核心步驟)
4,篩網(wǎng)過濾:過濾掉未消化完全的組織塊,得到純凈的單細(xì)胞懸液
5,預(yù)富集 / 梯度密度離心(Percoll):去除紅細(xì)胞、死細(xì)胞,富集目標(biāo)細(xì)胞,提升細(xì)胞純度
6,質(zhì)控:檢測細(xì)胞活性、濃度,確保符合流式上機要求
7,細(xì)胞凍存:用 DMSO 凍存試劑 + 凍存袋,長期保存細(xì)胞,方便后續(xù)實驗
四、不用自己摸條件!驗證過的組織解離試劑盒,開箱即用
很多科研人員在做組織消化時,都會遇到 “消化條件難摸、結(jié)果不穩(wěn)定” 的問題,優(yōu)寧維為大家準(zhǔn)備了經(jīng)過嚴(yán)格驗證、標(biāo)準(zhǔn)化的組織解離試劑盒,開箱即用,不用自己優(yōu)化條件,省心又高效:
小鼠組織系列:覆蓋小鼠腫瘤、肝臟、肺臟、腸道、心臟、腎臟、胰腺、脾臟、腦組織等幾乎所有常用組織,規(guī)格 10T/25T/30T 可選,滿足不同實驗規(guī)模
人源組織系列:Human 腫瘤組織解離試劑盒,專門適配人源腫瘤樣本的單細(xì)胞懸液制備
所有試劑盒都配套標(biāo)準(zhǔn)實驗 Protocol,還有 100 套樣本制備知識庫做支撐,幫你輕松搞定不同組織的樣本制備,實驗結(jié)果穩(wěn)定可重復(fù),大幅提升實驗效率。
五、優(yōu)寧維一站式樣本制備解決方案:全鏈路支持你的流式實驗
優(yōu)寧維作為生命科學(xué)一站式供應(yīng)商,不僅有齊全的樣本制備試劑(分離液、保存液、解離試劑盒等),更有完整的技術(shù)支持,幫你全流程無憂:
標(biāo)準(zhǔn)化的實驗 Protocol,新手也能快速上手
100 + 樣本制備知識庫,覆蓋不同樣本、不同組織的處理方法
專業(yè)的技術(shù)團隊,隨時解答實驗問題
旗下 uFLOW 流式專家、斯達特抗體等品牌,覆蓋流式實驗全流程試劑需求
整合 60 + 國際知名品牌與 5 + 自主品牌,提供全面、專業(yè)、安全、便捷的科研服務(wù)
真正實現(xiàn) “買流式產(chǎn)品找小優(yōu),流式實驗不用愁”,幫你從樣本制備到流式實驗全流程省心省力。