一、BRD4蛋白的結(jié)構(gòu)特征與生物學(xué)功能
BRD4全稱(chēng)為溴結(jié)構(gòu)域蛋白4，屬于BET蛋白家族成員。BET家族包含四種蛋白，即BRD2、BRD3、BRD4和BRDT，具有保守的模塊化結(jié)構(gòu)，包括兩段N-末端串聯(lián)BRD效應(yīng)模塊和一段額外的末端基團(tuán)。BRD4蛋白能夠與RNA聚合酶II和正向轉(zhuǎn)錄延長(zhǎng)因子結(jié)合，共同參與癌基因MYC、BCL2和BCL6等基因的轉(zhuǎn)錄過(guò)程。研究表明，BRD4蛋白占據(jù)超級(jí)增強(qiáng)子的基因位置，能讓癌細(xì)胞保持相對(duì)不成熟的類(lèi)干細(xì)胞狀態(tài)，在一定程度上驅(qū)動(dòng)癌癥的發(fā)生發(fā)展。Bromodomain試劑盒可用于定量檢測(cè)BRD4與乙酰化組蛋白的結(jié)合活性，為研究該蛋白的生物學(xué)功能提供技術(shù)工具。

二、BRD4作為抗腫瘤靶點(diǎn)的潛力
BRD4的表達(dá)失調(diào)與血癌、乳腺癌及結(jié)腸癌等多種癌癥的形成有關(guān)。BRD3和BRD4與睪丸中的核蛋白錯(cuò)誤融合，導(dǎo)致NUT中腺癌的發(fā)生。BRD4蛋白參與細(xì)胞周期調(diào)控，如參與細(xì)胞周期啟動(dòng)子A、D11和E等基因的啟動(dòng)激活。通過(guò)靶向抑制BRD4，可以誘發(fā)腫瘤細(xì)胞凋亡并減緩增殖，從而達(dá)到抗腫瘤作用。因此，BRD4作為一種極具潛力的抗腫瘤靶點(diǎn)，在近些年得到了廣泛關(guān)注和開(kāi)發(fā)。Bromodomain試劑盒可應(yīng)用于篩選能夠阻斷BRD4與乙�；�組蛋白結(jié)合的化合物，評(píng)估候選分子的抑制活性。

三、選擇性BRD4抑制劑的研發(fā)進(jìn)展
化合物Apabetalone是一種來(lái)自植物多酚白藜蘆醇的衍生物，顯示出對(duì)BRD4 BD2更強(qiáng)的抑制活性，對(duì)BRD4 BD2的Kd為135 nM，對(duì)BRD4 BD1的Kd為1142 nM。這種選擇性可能是由于化合物的苯環(huán)能夠與BD2的組氨酸433形成π-π堆積作用，而B(niǎo)D1中對(duì)應(yīng)的氨基酸為半胱氨酸。該化合物能夠有效降低高血脂糖尿病患者的血脂水平，用于治療前驅(qū)糖尿病、動(dòng)脈粥樣硬化和急性冠脈綜合癥的研究處于臨床階段。Bromodomain試劑盒可用于評(píng)估此類(lèi)選擇性抑制劑對(duì)不同溴結(jié)構(gòu)域的結(jié)合偏好性。

四、異惡唑結(jié)構(gòu)BRD4抑制劑的臨床研究
化合物CPI-0610是一種異惡唑結(jié)構(gòu)BRD4抑制劑，針對(duì)BRD4的IC50為120 nM。該化合物在口服給藥30 mg/kg每天時(shí)，對(duì)急性白血病腫瘤的抑瘤率為41%。在淋巴瘤患者上也顯示出較好的療效，目前正在開(kāi)展臨床研究。這類(lèi)抑制劑通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合BRD4的溴結(jié)構(gòu)域，阻斷其與乙�；�組蛋白的相互作用，從而抑制下游癌基因的轉(zhuǎn)錄。Bromodomain試劑盒可用于檢測(cè)此類(lèi)化合物對(duì)BRD4與組蛋白結(jié)合的直接抑制作用。

五、苯并氮卓類(lèi)BRD抑制劑的藥代動(dòng)力學(xué)特性
化合物I-BET762是苯并氮卓類(lèi)BRD抑制劑，具有較好的滲透性、較高的溶解度、良好的組織分布以及口服生物利用度，在嚙齒類(lèi)動(dòng)物、犬類(lèi)和靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物中表現(xiàn)出優(yōu)良的藥代動(dòng)力學(xué)特性。該化合物在各種腫瘤模型和炎癥模型上顯示出良好的藥效，目前已進(jìn)入臨床研究階段。這類(lèi)化合物的藥代動(dòng)力學(xué)優(yōu)勢(shì)使其具備進(jìn)一步開(kāi)發(fā)的潛力。Bromodomain試劑盒可用于評(píng)估不同化合物對(duì)BRD4的結(jié)合親和力，為構(gòu)效關(guān)系研究提供定量數(shù)據(jù)。

六、吡啶酮類(lèi)BRD4靶向抑制劑的開(kāi)發(fā)
化合物Mivebresib是吡啶酮類(lèi)BRD4靶向抑制劑，顯示出良好的藥物代謝和藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)，具有良好的暴露量和較長(zhǎng)的半衰期。該化合物在各種腫瘤模型中都顯示出良好的生物學(xué)活性，目前正處于治療實(shí)體瘤和血液癌癥的臨床研究階段。這類(lèi)抑制劑的開(kāi)發(fā)代表了BRD4靶向藥物的最新進(jìn)展，其優(yōu)化的藥代動(dòng)力學(xué)特性為臨床應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。Bromodomain試劑盒在藥物優(yōu)化過(guò)程中可用于快速評(píng)估化合物的靶點(diǎn)結(jié)合能力。

七、BRD4靶向藥物研究的挑戰(zhàn)與展望
目前已有多個(gè)以BRD4為靶點(diǎn)的藥物進(jìn)入臨床試驗(yàn)研究階段，但文獻(xiàn)和專(zhuān)利等公開(kāi)報(bào)道的抑制劑結(jié)構(gòu)類(lèi)型仍相對(duì)有限，小分子成藥性亟待提高�，F(xiàn)有抑制劑主要通過(guò)與BRD4的溴結(jié)構(gòu)域競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合發(fā)揮作用，但選擇性和藥代動(dòng)力學(xué)特性仍需進(jìn)一步優(yōu)化。針對(duì)BRD4蛋白進(jìn)一步進(jìn)行新型抗腫瘤藥物研究具有極大的拓展空間。Bromodomain試劑盒作為研究BRD4與抑制劑相互作用的工具，在藥物發(fā)現(xiàn)和優(yōu)化過(guò)程中具有重要應(yīng)用價(jià)值。

基于Bromodomain檢測(cè)技術(shù)的BRD4靶向藥物研究進(jìn)展-南京優(yōu)愛(ài)(UA BIO), 重組蛋白專(zhuān)家