基于自動化成像的細胞趨化運動軌跡定量分析
瀏覽次數:540 發(fā)布日期:2025-10-30
來源:安捷倫科技
細胞趨化實驗
在生命有機體中,每一次細胞的遷移都是一場精妙的航行。而通過體外細胞趨化實驗能夠幫助研究者更好地探索細胞在微觀世界的奇妙之旅。
細胞趨化現象,就是細胞對化學物質濃度梯度的響應和移動。它們自帶”導航系統”,通過感知周圍環(huán)境中特定分子的信號,決定向哪個方向移動,完成諸如免疫應答、傷口愈合等重要任務。體外細胞趨化實驗的設計中,將細胞置于含有化學梯度的培養(yǎng)皿或者耗材中,通過動態(tài)顯微鏡成像,研究者可以清晰地看到細胞如何向高濃度區(qū)域“踏浪前進”的運動軌跡。
圖:化學趨向性是細胞向可溶性化學梯度遷移的過程,前向遷移指數是衡量細胞對化學梯度方向反應的一種指標。
安捷倫細胞軌跡運動分析方案
細胞趨化實驗也面臨著諸多挑戰(zhàn),例如,如何在體外精確模擬復雜的體內環(huán)境,如何定量細胞趨化運動,如何確保實驗結果的普適性和可重復性等,而安捷倫的細胞軌跡運動分析方案能夠為細胞趨化實驗提供自動化的成像平臺及一站式的細胞運動軌跡追蹤圖像分析定量軟件。
成像
圖:Agilent 成像設備聯合 ibidi µ-Slide Chemotaxis 進行細胞趨化實驗檢測。A:Cytation 系列多功能成像系統,B:LionheartFX 智能活細胞成像系統,C:ibidi µ-Slide Chemotaxis 玻片的 A/B 通道成像區(qū)域示意圖,D:Agilent 成像設備使用 DAPI 和相差通道對細胞趨化區(qū)域的成像圖片。
圖像處理
圖:Agilent 的 Gen5 圖像分析軟件對細胞趨化的圖像進行背景優(yōu)化處理,便于后續(xù)的細胞軌跡運動定量分析。A:Gen5 Imge 軟件的圖像去背景處理效果。B:對細胞趨化時間序列圖像進行批量去背景處理后的效果。
細胞運動軌跡分析
圖:Agilent 的 Gen5 細胞軌跡追蹤模塊(Object Tracking Module)具備強大的實時細胞運動分析功能。A:軟件可輸出單細胞參數追蹤曲線(Object curve),包括細胞大小、細胞熒光信號變化、細胞形態(tài)變化等參數。B:軟件界面可靈活查看細胞的運動軌跡以及軌跡參數,包括運動總距離、歐幾里得距離、運動角度、運動速度等參數。C:Gen5 軟件識別趨化實驗中分析區(qū)域的 DAPI 標記的細胞核,并使用 Object Tracking 模塊定量分析細胞的運動軌跡。
數據結果輸出及發(fā)表
圖:趨化運動定量統計結果輸出。A:Gen5 軟件可自動分析獲得每個細胞的運動角度(Direction)。B:通過計算平行趨化劑梯度方向 (FMIII) 角度和垂直于梯度方向 (FMI⊥) 角度的正向遷移指數對細胞的趨化性進行定量評價。
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關于安捷倫細胞分析
安捷倫細胞分析平臺包括xCELLigence RTCA實時細胞分析儀、NovoCyte系列流式細胞儀、Seahorse能量代謝分析儀以及Synergy系列微孔板檢測儀和Cytation 系列(共聚焦)細胞成像多功能微孔板檢測儀。安捷倫細胞分析平臺聚焦基礎科研與細胞與基因治療產品的開發(fā)全流程,作為適配新一代療法的強大分析工具,提供多方位的細胞效力檢測和深度的細胞分析,并致力于研發(fā)、生產質控以及臨床的全方位檢測與分析方案開發(fā)。