文章來(lái)源公眾號(hào)：Bloki           作者：Bloki

對(duì)LNP、病毒的靶向修飾是當(dāng)下熱點(diǎn)，24年，諾獎(jiǎng)得主Jennifer A. Doudna發(fā)過(guò)一篇Nature Biotechnology，用scFv修飾的病毒樣顆粒遞送RNP實(shí)現(xiàn)體內(nèi)基因編輯，具體內(nèi)容如下：

22年，一篇Cell用scFv+突變VSVG的病毒實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞靶向遞送GFP

作者計(jì)劃用scFv（藍(lán)色）+突變VSVG（黃色）的病毒樣顆粒遞送RNP（Cas-gRNA復(fù)合物）

294T細(xì)胞同時(shí)表達(dá)EGFP和抗原，制備出工具靶細(xì)胞，和陰性細(xì)胞混合

CD19 scFv修飾的病毒樣顆粒遞送敲B2M的RNP，特異性的敲CD19+細(xì)胞的B2M優(yōu)化，引入核轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)NES和NLS肽，提高編輯效率

優(yōu)化后，不同細(xì)胞上均可高效實(shí)現(xiàn)基因編輯

GS-CA1抑制病毒入核會(huì)影響慢病毒介導(dǎo)熒光蛋白表達(dá)，但不影響遞送RNP的病毒樣顆粒實(shí)現(xiàn)基因編輯（敲B2M）  

表征scFv修飾的病毒樣顆粒 

CD3、CD28 scFv修飾的病毒樣顆粒實(shí)現(xiàn)基因編輯的同時(shí)還可以促進(jìn)T細(xì)胞激活、增殖

CD3 scFv修飾的病毒樣顆粒敲B2M

CD3、CD4雙scFv修飾的病毒樣顆粒高效、特異性敲CD4 T細(xì)胞的B2M – 雙靶向scFv修飾比較新穎，之前分享的一篇文章也用過(guò)類似策略可以體內(nèi)制備CAR-T的慢病毒 

體內(nèi)介導(dǎo)CD19 CAR表達(dá)，實(shí)現(xiàn)基因編輯 

用小鼠體重初步說(shuō)明安全性 

體內(nèi)搞掉部分B細(xì)胞 

體內(nèi)制備CAR-T、體內(nèi)基因編輯都是熱點(diǎn)，雙scFv修飾的玩法值得關(guān)注，筆者還沒(méi)見(jiàn)到LNP上玩雙靶向。