近日，《中國(guó)生物制品學(xué)雜志》2026年第2期上發(fā)表了題為《細(xì)胞種屬鑒別多重PCR法的優(yōu)化及驗(yàn)證》的研究論文。通過(guò)對(duì)原有細(xì)胞種屬鑒別多重PCR法進(jìn)行系統(tǒng)性再優(yōu)化與大規(guī)模驗(yàn)證，成功建立了一種快速、靈敏、高穩(wěn)健性的標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)方法，為2025年版《中國(guó)藥典》新增通則3430提供了堅(jiān)實(shí)的技術(shù)支撐。

研究針對(duì)豬、中國(guó)倉(cāng)鼠、非洲綠猴和大鼠4個(gè)物種的引物序列及核酸提取方式、引物和參比細(xì)胞混合基因組DNA的配比、PCR擴(kuò)增程序及DNA模板用量等關(guān)鍵參數(shù)逐一優(yōu)化，優(yōu)化后的方法操作流程標(biāo)準(zhǔn)化，無(wú)需復(fù)雜操作，可實(shí)現(xiàn)單管單次反應(yīng)完成多物種檢測(cè)，徹底解決原方法跨實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用時(shí)非特異性擴(kuò)增、條帶缺失的問(wèn)題，耐用性大幅提升。

經(jīng)過(guò)對(duì)優(yōu)化后方法的靈敏度、交叉污染檢測(cè)限度及不同實(shí)驗(yàn)室間復(fù)核的多重嚴(yán)苛驗(yàn)證，該方法檢測(cè)性能表現(xiàn)亮眼，可成功用于10個(gè)種屬（豬、人、貓、中國(guó)倉(cāng)鼠、恒河猴、非洲綠猴、大鼠、犬、小鼠、牛）的細(xì)胞鑒別檢測(cè)，檢測(cè)靈敏度可達(dá)50 ~ 5 000個(gè)細(xì)胞，同時(shí)，在交叉污染的檢測(cè)上靈敏度也較高，可檢測(cè)到1∶100 ~ 1∶10 000的細(xì)胞污染，并在4家不同實(shí)驗(yàn)室盲樣驗(yàn)證均100%成功，可準(zhǔn)確判定單一種屬細(xì)胞，也能精準(zhǔn)識(shí)別交叉污染樣本的主細(xì)胞與污染種屬。

A~D：分別為4家復(fù)核驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)室
（1,2:S1;3,4:S2;5,6:S3;7,8:S4;9,10:S5;11,12:S6;13,14:S7;15,16:S8;17,18:S9;19:10個(gè)種屬的混合細(xì)胞基因組 DNA;20:NTC;21:NCS;M:50 bp DNA ladder)。
圖1：復(fù)核驗(yàn)證結(jié)果

在生物制藥與細(xì)胞治療領(lǐng)域，細(xì)胞是研發(fā)與生產(chǎn)的核心“種子”。然而，細(xì)胞混淆與交叉污染一直是困擾行業(yè)的“幽靈”，可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)失真、工藝不穩(wěn)定，甚至引發(fā)嚴(yán)重的產(chǎn)品安全性問(wèn)題。傳統(tǒng)鑒別方法如同工酶法靈敏度低、染色體核型分析操作繁瑣，已難以滿足現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)對(duì)高通量、標(biāo)準(zhǔn)化、高靈敏度質(zhì)控的迫切需求。

本研究確立的方法憑借其特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、跨實(shí)驗(yàn)室適用性好的綜合優(yōu)勢(shì)，可應(yīng)用于生物制藥研發(fā)、生產(chǎn)、檢定各環(huán)節(jié)的細(xì)胞種屬鑒別與交叉污染檢測(cè)，為生產(chǎn)用細(xì)胞、檢定用細(xì)胞的質(zhì)量把控提供標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)手段，且已被收錄于2025年版《中華人民共和國(guó)藥典》第3430章節(jié)，這標(biāo)志著此方法從一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室優(yōu)化技術(shù)，正式成為了國(guó)家層面的法定檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，為整個(gè)生物制藥行業(yè)的細(xì)胞質(zhì)量控制提供了統(tǒng)一、權(quán)威的技術(shù)依據(jù)。

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參考文獻(xiàn)
[1]吳雪伶,張琪夢(mèng),納濤,等.細(xì)胞種屬鑒別多重PCR法的優(yōu)化及驗(yàn)證[J].中國(guó)生物制品學(xué)志,2026,39(02):180-188.DOI:10.13200/j.cnki.cjb.004655.

細(xì)胞種屬鑒別檢測(cè)試劑盒
（多重 PCR 法） 

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特點(diǎn)：

• 特異性高：PCR擴(kuò)增子明確單一。
• 操作簡(jiǎn)單：試劑盒含提取緩沖液，提取細(xì)胞DNA后直接進(jìn)行PCR擴(kuò)增，免去了復(fù)雜的細(xì)胞DNA提取純化過(guò)程。
• 檢測(cè)靈敏度高：交叉污染檢測(cè)限可達(dá)到1%及以下，細(xì)胞用量可少至5×10⁵。
• 檢測(cè)效率高：采用單孔10重反應(yīng)體系，提高了檢測(cè)效率。
• 真實(shí)客觀：以細(xì)胞數(shù)量為單位來(lái)反映可能存在的污染情況。
• 結(jié)果確定：根據(jù)擴(kuò)增子的條帶數(shù)量和條帶大小進(jìn)行結(jié)果判定，更清晰明了。
• 自主研發(fā)和穩(wěn)定供應(yīng)：組分自主研發(fā)，可保證供貨和批次間質(zhì)量穩(wěn)定。