在病理技術(shù)工作中,有句話廣為流傳:“診斷是靈魂,技術(shù)是基礎(chǔ),取材是關(guān)鍵。”取材的好壞,直接影響切片的質(zhì)量,甚至決定了病理診斷的準(zhǔn)確性。無論后續(xù)的脫水、包埋、切片、染色技術(shù)多么精湛,如果取材環(huán)節(jié)出了問題,最終得到的切片質(zhì)量也必然大打折扣。因此,掌握規(guī)范的取材技術(shù),是每一名病理技術(shù)人員的基本功。
一、取材工具:鋒利是前提要有一把鋒利的取材刀,這是取材工作最基本的要求。鈍刀切割組織時(shí),會(huì)產(chǎn)生擠壓和牽拉,導(dǎo)致組織細(xì)胞形態(tài)改變,甚至造成組織破碎。更嚴(yán)重的是,鈍刀切割時(shí)容易在組織斷面上形成“擠壓帶”——鏡下可見細(xì)胞變形、核拉長、排列紊亂,直接影響診斷。
在切割組織時(shí),要避免取材刀來回拖拉。正確的做法是一刀切下去,動(dòng)作干脆利落。來回拖拉會(huì)使組織斷面形成鋸齒狀,造成細(xì)胞損傷和組織碎屑脫落,同時(shí)也會(huì)使組織塊形態(tài)不規(guī)則,影響后續(xù)包埋時(shí)的方向判斷。
實(shí)用建議:取材刀應(yīng)定期研磨,保持鋒利。取材過程中,每次切割后應(yīng)用濕紗布擦拭刀面,避免組織殘留影響下一塊取材。對(duì)于需要大量取材的科室,建議準(zhǔn)備2-3把取材刀交替使用,確保每刀都鋒利如初。
二、組織塊大小與厚度:均勻是關(guān)鍵切取的組織塊厚薄要均勻,這是保證組織處理質(zhì)量的基礎(chǔ)。脫水、透明、浸蠟等步驟都有賴于試劑在組織內(nèi)的均勻滲透。如果同一批組織塊厚薄不一,薄的組織可能處理過度,厚的組織又可能處理不足。
標(biāo)準(zhǔn)尺寸參考:一般厚度以0.2~0.3cm,大小以1.5×2.0cm為適宜。這個(gè)尺寸既能保證試劑充分滲透,又能滿足診斷所需的組織面積。過大的組織塊會(huì)延長處理時(shí)間,過小的組織塊則不利于定位和切片。
需要注意的是,以上尺寸是針對(duì)常規(guī)組織而言的。對(duì)于不同類型、不同質(zhì)地的組織,應(yīng)根據(jù)其特性靈活調(diào)整。
三、不同組織的取材要點(diǎn)較容易發(fā)脆的組織如甲狀腺、肝臟、血塊、淋巴結(jié)、大塊癌組織等,可適當(dāng)厚一點(diǎn)(0.3~0.4cm)。這類組織質(zhì)地脆,過薄容易在后續(xù)處理中碎裂,稍厚一些反而有助于保持完整性。
脂肪組織、肺組織、纖維性腫瘤、平滑肌瘤等致密的或試劑不易滲入的組織,則應(yīng)略取薄一些(0.15~0.2cm)。脂肪組織因?yàn)橹|(zhì)成分高,脫水透明難度大;肺組織因富含空氣,需要更充分的處理;纖維性腫瘤和平滑肌瘤質(zhì)地致密,試劑滲透慢,薄取才能保證充分處理。
淋巴結(jié)的取材是臨床病理工作中最常見的操作之一。淋巴結(jié)應(yīng)修掉兩側(cè)球冠(即“帽子”部分),只取中間最飽滿的區(qū)域。同時(shí),盡量剔除周圍脂肪組織,因?yàn)檫^多的脂肪不僅影響脫水效果,還會(huì)在切片時(shí)造成蠟塊松動(dòng),導(dǎo)致脫片。但要注意,剔除脂肪時(shí)不要損傷淋巴結(jié)的被膜——被膜對(duì)淋巴瘤的診斷有重要價(jià)值。
含有特殊成分的組織,如組織內(nèi)有縫線、釘書針或骨組織,必須除去或避開。這些異物在切片時(shí)會(huì)造成刀片崩口,不僅破壞切片質(zhì)量,還可能損傷切片機(jī)。如果碰到不可避免的骨組織或鈣化組織(如骨腫瘤、鈣化的淋巴結(jié)或子宮肌瘤),應(yīng)與技術(shù)室講明,進(jìn)行脫鈣處理。脫鈣后的組織質(zhì)地會(huì)變軟,切片時(shí)需特別小心。
四、纖維走向:順應(yīng)紋理在切取纖維組織、肌肉組織時(shí),應(yīng)注意纖維或肌肉的走向。這是保證切片完整性的重要細(xì)節(jié)。
正確做法:盡可能選擇與纖維或肌肉走向平行,并以此為長軸切取。這樣切出的組織塊,在包埋和切片時(shí),纖維或肌纖維的長軸與切面方向一致,切片時(shí)組織不易斷裂,鏡下觀察時(shí)纖維的排列和結(jié)構(gòu)也能完整呈現(xiàn)。
如果橫切纖維走向,切片時(shí)纖維會(huì)被切斷,鏡下呈現(xiàn)“截面”狀態(tài),不僅難以判斷纖維走向,還可能造成人為的“變性”假象,誤導(dǎo)診斷。這一點(diǎn)在處理子宮肌瘤、平滑肌肉瘤、纖維瘤、神經(jīng)纖維瘤等腫瘤時(shí)尤為重要。
五、取材中的常見錯(cuò)誤及對(duì)策| 常見錯(cuò)誤 | 后果 | 正確做法 |
|---|---|---|
| 刀具鈍、來回拖拉 | 組織擠壓變形、斷面不齊 | 定期磨刀,一刀切下 |
| 組織塊厚薄不均 | 處理不勻,有的過度有的不足 | 統(tǒng)一厚度,用尺測(cè)量 |
| 淋巴結(jié)帶過多脂肪 | 脫水不凈、脫片 | 剔除脂肪,保留被膜 |
| 忽略纖維走向 | 切片斷裂、結(jié)構(gòu)混亂 | 順纖維長軸切取 |
| 未標(biāo)記骨組織 | 損傷刀片、無法切片 | 標(biāo)明需脫鈣,溝通技術(shù)室 |
記。阂坏肚邢氯ィ瑳Q定的是整個(gè)病理報(bào)告的準(zhǔn)確性。