發(fā)表于《Preparative Biochemistry & Biotechnology》期刊的研究論文《Study on covalent coupling process and flow characteristics of antibody on the surface of immunoassay microfluidic chip》,文中對(duì)抗體在免疫分析微流控芯片上偶聯(lián)特性以及流動(dòng)特性進(jìn)行分析研究。
微流控芯片集成了樣品反應(yīng)、處理和分離整個(gè)過程,與傳統(tǒng)檢測(cè)方式相比,具有體積小、試劑消耗少、檢測(cè)時(shí)間短、操作方便等諸多特點(diǎn)。因此,被廣泛應(yīng)用在分子診斷和即時(shí)檢測(cè)(POCT)領(lǐng)域。
微流控芯片的免疫檢測(cè)反應(yīng)是一個(gè)動(dòng)態(tài)過程,需要將反應(yīng)物持續(xù)運(yùn)送到固相載體表面。目前,大多研究集中在免疫反應(yīng)的底物上,而對(duì)反應(yīng)物的流量以及流速等特性的研究十分有限。如何結(jié)合微流控芯片內(nèi)部結(jié)構(gòu)得到最佳流速的免疫檢測(cè),成為芯片表面修飾技術(shù)急需解決的問題之一。
本文研究了幾種聚苯乙烯亞基表面修飾的工藝,用于闡明抗體固定與流速對(duì)免疫反應(yīng)效果的影響。抗體采用共價(jià)結(jié)合的方式進(jìn)行固定,基于酶聯(lián)免疫吸附原理進(jìn)行熒光定量檢測(cè)及免疫應(yīng)答過程的評(píng)估。另外,以降鈣素原為例,系統(tǒng)地研究了抗體共價(jià)偶聯(lián)過程和流動(dòng)特性對(duì)免疫檢測(cè)結(jié)果的影響,為免疫檢測(cè)微流控芯片的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)提供理論基礎(chǔ)。
作者單位:清華大學(xué)精密/超精密制造裝備與控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,清華大學(xué)天津先進(jìn)裝備研究院
期刊:Preparative Biochemistry & Biotechnology
發(fā)表年份:2021年
樣本:蛋白抗體
芯片類型:自制微流控芯片
芯片點(diǎn)樣儀:M2公司iTWO 200生物芯片點(diǎn)樣儀
芯片設(shè)計(jì)和免疫反應(yīng)原理如圖1所示:使用德國(guó)M2-Automation公司的非接觸式生物芯片點(diǎn)樣儀將標(biāo)記物(熒光微球)點(diǎn)印在反應(yīng)區(qū),特異性抗體點(diǎn)印在測(cè)試區(qū)(僅與感興趣的抗原結(jié)合),非特異性抗體點(diǎn)印在對(duì)照區(qū)(只與標(biāo)記物或抗原結(jié)合)制備成微流控檢測(cè)芯片。當(dāng)含有抗原的血液流經(jīng)反應(yīng)區(qū)時(shí),抗原在反應(yīng)區(qū)與標(biāo)記物結(jié)合,通過檢測(cè)區(qū)后,標(biāo)記抗原被特異性抗體捕獲,形成“抗體-抗原-抗體免疫復(fù)合物”,從而產(chǎn)生熒光,當(dāng)血液流入控制區(qū)域時(shí)非特異性抗體捕獲未結(jié)合的標(biāo)記抗體。最后使用熒光掃描分析儀進(jìn)行熒光信號(hào)分析。
結(jié)果顯示:對(duì)血液中降鈣素原檢測(cè)過程中,研究人員發(fā)現(xiàn)平均流速約為0.2 mm/s時(shí)免疫反應(yīng)信號(hào)最強(qiáng);與氨基和醛基修飾相比,環(huán)氧基修飾的芯片抗體免疫效率最高,對(duì)于小分子基團(tuán)修飾的芯片,引入聚L -賴氨酸可以增加抗體的固定數(shù)量。
原文鏈接:
https://doi.org/10.1080/10826068.2021.1958344
M2-Automation成立于2003年,總部位于德國(guó)柏林,是一家創(chuàng)新技術(shù)開發(fā)公司,專注于皮升/納升級(jí)-超微量/微量、非接觸式自動(dòng)化移液和生物芯片點(diǎn)樣技術(shù)。
* 定位精度高,點(diǎn)樣體積精準(zhǔn)、重復(fù)性好;
* 全程自動(dòng)化點(diǎn)樣,配置靈活,環(huán)境控制、平臺(tái)、噴頭等可定制;
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* 進(jìn)行微孔板點(diǎn)樣、微針/微柱點(diǎn)樣、覆膜芯片點(diǎn)樣、酶液點(diǎn)樣
* 生物傳感器點(diǎn)樣,微流控芯片點(diǎn)樣,電化學(xué)芯片點(diǎn)樣、光電芯片點(diǎn)樣等,
* 用于POCT臨床快檢、多重標(biāo)記物免疫檢測(cè)、分子診斷、血糖監(jiān)測(cè)、靶點(diǎn)篩選等領(lǐng)域。
環(huán)亞生物科技(APG BIO)作為德國(guó)M2-Automation公司中國(guó)區(qū)獨(dú)家代理,為客戶提供生物芯片點(diǎn)樣、掃描以及高通量篩選的整體解決方案和服務(wù)。