一、IL-17細(xì)胞因子家族的分子特征
1993年，研究者首次從活化的小鼠T淋巴細(xì)胞cDNA文庫中克隆出細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原8，后來被稱為IL-17A。IL-17A基因與當(dāng)時已知的其他細(xì)胞因子家族沒有同源性，但與嗜T細(xì)胞皰疹病毒基因13有57%的同源性。通過同源基因篩選發(fā)現(xiàn)了IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E和IL-17F，與IL-17A共同組成IL-17細(xì)胞因子家族。人和小鼠的IL-17家族成員具有63%至88%的同源性。除IL-17D外，其他成員可通過二硫鍵形成同源二聚體，其中IL-17A和IL-17F具有50%同源性，可形成異二聚體。TR-FRET IL-17A/IL-17RA試劑盒可用于定量檢測IL-17A與受體的結(jié)合活性，為研究該信號通路提供技術(shù)工具。

二、IL-17受體家族的組成與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制
1995年IL-17A受體蛋白被發(fā)現(xiàn)，命名為IL-17RA。2003年通過基因序列相似性檢索找到了其他四個同源受體，與IL-17RA共同組成IL-17受體家族。該家族成員均為單次跨膜蛋白，含有胞外纖連蛋白Ⅲ樣結(jié)構(gòu)域以及胞內(nèi)SEF/IL-17R結(jié)構(gòu)域。SEFIR結(jié)構(gòu)域?qū)τ谛盘栟D(zhuǎn)導(dǎo)非常重要，其需要募集Act-1蛋白，Act-1蛋白也包含一段SEFIR序列，通過同型SEFIR序列的結(jié)合，Act-1蛋白被IL-17R募集進(jìn)而介導(dǎo)下游級聯(lián)信號。IL-17RA和IL-17RC具有SEFIR結(jié)構(gòu)域，可以招募受體近端接頭分子Act1，激活TRAF6-TAK1-NF-κB、TRAF6-MAPK-AP1、TRAF6-C/EBP等途徑調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄。TR-FRET技術(shù)可應(yīng)用于研究IL-17A與IL-17RA結(jié)合后的構(gòu)象變化以及不同突變對信號通路激活的影響。

三、IL-17A/IL-17F在自身免疫病中的作用
IL-17家族中研究最多的是IL-17A和IL-17F，由Th17、CD8陽性T細(xì)胞、γδT細(xì)胞、NKT細(xì)胞、NK細(xì)胞和ILC3等細(xì)胞產(chǎn)生。在銀屑病中，Th17產(chǎn)生的IL-17A刺激角質(zhì)形成細(xì)胞產(chǎn)生促炎細(xì)胞因子、抗菌肽和趨化因子，引起皮膚免疫功能異常與角質(zhì)形成細(xì)胞過度分裂增殖。銀屑病病變組織中IL-17A表達(dá)水平比正常人高約90倍。在多發(fā)性硬化中，IL-17的mRNA在患者血液和腦脊液中表達(dá)增加，Th17細(xì)胞通過血腦屏障在病變區(qū)域積聚，產(chǎn)生GM-CSF等炎性細(xì)胞因子，導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)髓磷脂損傷。TR-FRET IL-17A/IL-17RA試劑盒可用于篩選能夠阻斷IL-17A與受體結(jié)合的抗體分子，評估其結(jié)合親和力和特異性。

四、IL-17A/IL-17F在炎癥性腸病中的雙重作用
IL-17A的表達(dá)在活動性潰瘍性結(jié)腸炎或克羅恩病患者的血清和發(fā)炎粘膜中顯著增加。使用抗IL-17F抗體能緩解小鼠腸炎，但抗IL-17A抗體則不能。IL-17A在炎癥性腸病中可能發(fā)揮不同甚至相反的作用：一方面可以直接抑制Th1細(xì)胞發(fā)育抑制炎癥；另一方面可能通過誘導(dǎo)腸上皮細(xì)胞發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化，促進(jìn)腸道炎癥和纖維化。IL-17A和IL-17F在炎癥性腸病中的作用是雙刃劍，既保護(hù)腸道免受感染和損傷，也可能促進(jìn)病理進(jìn)程。TR-FRET技術(shù)可應(yīng)用于定量檢測不同阻斷策略對IL-17A與受體結(jié)合的影響，為理解其雙重作用機(jī)制提供分子水平依據(jù)。

五、IL-17家族其他成員的生物學(xué)功能
IL-17E由Th2細(xì)胞、肥大細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞等產(chǎn)生，受體是IL-17RA和IL-17RB的異二聚體，在調(diào)節(jié)Ⅱ型免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要作用，與過敏性肺炎、哮喘、寄生蟲感染等疾病相關(guān)。IL-17B通過與IL-17RB受體結(jié)合，在許多惡性疾病中具有重要作用，可通過激活NF-κB和AP-1誘導(dǎo)IL-8表達(dá)促進(jìn)血管生成。IL-17C主要來源于上皮細(xì)胞，在銀屑病患者皮膚中蛋白質(zhì)水平比IL-17A高約100倍。IL-17D受體CD93于2021年被發(fā)現(xiàn)，IL-17D通過與其受體CD93的結(jié)合調(diào)節(jié)腸道內(nèi)ILC3的功能，維持腸道內(nèi)穩(wěn)態(tài)。不同家族成員通過各自獨(dú)特的受體組合和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，在免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮多樣化功能。

六、IL-17信號通路的臨床研究進(jìn)展
針對IL-17及其受體的單克隆抗體藥物已在臨床研究中取得進(jìn)展。靶向IL-17A的單抗用于治療中重度斑塊型銀屑病和銀屑病關(guān)節(jié)炎，同時靶向IL-17A和IL-17F的雙特異性單抗也應(yīng)用于臨床。靶向IL-17RA的單抗同樣用于治療中重度斑塊型銀屑病。IL-17C抗體在特應(yīng)性皮炎患者的臨床試驗中顯示出癥狀改善效果。IL-25抗體作為全球首個針對IL-25的抗體藥物，處于早期臨床研究階段，用于治療炎癥和過敏性疾病。TR-FRET IL-17A/IL-17RA試劑盒在這些抗體藥物的篩選和表征中具有重要應(yīng)用價值，可提供高通量、高靈敏度的結(jié)合活性檢測。

基于TR-FRET技術(shù)的IL-17A/IL-17RA信號通路結(jié)構(gòu)與功能研究-南京優(yōu)愛(UA BIO), 重組蛋白專家