一、BRD4蛋白的結(jié)構(gòu)特征與生物學(xué)功能
BRD4全稱為溴結(jié)構(gòu)域蛋白4，屬于BET蛋白家族成員。BET家族包含四種蛋白，即BRD2、BRD3、BRD4和BRDT，具有保守的模塊化結(jié)構(gòu)，包括兩段N-末端串聯(lián)BRD效應(yīng)模塊和一段額外的末端基團(tuán)。BRD4蛋白能夠與RNA聚合酶II和正向轉(zhuǎn)錄延長因子結(jié)合，共同參與癌基因MYC、BCL2和BCL6等基因的轉(zhuǎn)錄過程。研究表明，BRD4蛋白占據(jù)超級增強子的基因位置，能讓癌細(xì)胞保持相對不成熟的類干細(xì)胞狀態(tài)，在一定程度上驅(qū)動癌癥的發(fā)生發(fā)展。Bromodomain試劑盒可用于定量檢測BRD4與乙酰化組蛋白的結(jié)合活性，為研究該蛋白的生物學(xué)功能提供技術(shù)工具。

二、BRD4作為抗腫瘤靶點的潛力
BRD4的表達(dá)失調(diào)與血癌、乳腺癌及結(jié)腸癌等多種癌癥的形成有關(guān)。BRD3和BRD4與睪丸中的核蛋白錯誤融合，導(dǎo)致NUT中腺癌的發(fā)生。BRD4蛋白參與細(xì)胞周期調(diào)控，如參與細(xì)胞周期啟動子A、D11和E等基因的啟動激活。通過靶向抑制BRD4，可以誘發(fā)腫瘤細(xì)胞凋亡并減緩增殖，從而達(dá)到抗腫瘤作用。因此，BRD4作為一種極具潛力的抗腫瘤靶點，在近些年得到了廣泛關(guān)注和開發(fā)。Bromodomain試劑盒可應(yīng)用于篩選能夠阻斷BRD4與乙�；�組蛋白結(jié)合的化合物，評估候選分子的抑制活性。

三、選擇性BRD4抑制劑的研發(fā)進(jìn)展
化合物Apabetalone是一種來自植物多酚白藜蘆醇的衍生物，顯示出對BRD4 BD2更強的抑制活性，對BRD4 BD2的Kd為135 nM，對BRD4 BD1的Kd為1142 nM。這種選擇性可能是由于化合物的苯環(huán)能夠與BD2的組氨酸433形成π-π堆積作用，而BD1中對應(yīng)的氨基酸為半胱氨酸。該化合物能夠有效降低高血脂糖尿病患者的血脂水平，用于治療前驅(qū)糖尿病、動脈粥樣硬化和急性冠脈綜合癥的研究處于臨床階段。Bromodomain試劑盒可用于評估此類選擇性抑制劑對不同溴結(jié)構(gòu)域的結(jié)合偏好性。

四、異惡唑結(jié)構(gòu)BRD4抑制劑的臨床研究
化合物CPI-0610是一種異惡唑結(jié)構(gòu)BRD4抑制劑，針對BRD4的IC50為120 nM。該化合物在口服給藥30 mg/kg每天時，對急性白血病腫瘤的抑瘤率為41%。在淋巴瘤患者上也顯示出較好的療效，目前正在開展臨床研究。這類抑制劑通過競爭性結(jié)合BRD4的溴結(jié)構(gòu)域，阻斷其與乙酰化組蛋白的相互作用，從而抑制下游癌基因的轉(zhuǎn)錄。Bromodomain試劑盒可用于檢測此類化合物對BRD4與組蛋白結(jié)合的直接抑制作用。

五、苯并氮卓類BRD抑制劑的藥代動力學(xué)特性
化合物I-BET762是苯并氮卓類BRD抑制劑，具有較好的滲透性、較高的溶解度、良好的組織分布以及口服生物利用度，在嚙齒類動物、犬類和靈長類動物中表現(xiàn)出優(yōu)良的藥代動力學(xué)特性。該化合物在各種腫瘤模型和炎癥模型上顯示出良好的藥效，目前已進(jìn)入臨床研究階段。這類化合物的藥代動力學(xué)優(yōu)勢使其具備進(jìn)一步開發(fā)的潛力。Bromodomain試劑盒可用于評估不同化合物對BRD4的結(jié)合親和力，為構(gòu)效關(guān)系研究提供定量數(shù)據(jù)。

六、吡啶酮類BRD4靶向抑制劑的開發(fā)
化合物Mivebresib是吡啶酮類BRD4靶向抑制劑，顯示出良好的藥物代謝和藥代動力學(xué)性質(zhì)，具有良好的暴露量和較長的半衰期。該化合物在各種腫瘤模型中都顯示出良好的生物學(xué)活性，目前正處于治療實體瘤和血液癌癥的臨床研究階段。這類抑制劑的開發(fā)代表了BRD4靶向藥物的最新進(jìn)展，其優(yōu)化的藥代動力學(xué)特性為臨床應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。Bromodomain試劑盒在藥物優(yōu)化過程中可用于快速評估化合物的靶點結(jié)合能力。

七、BRD4靶向藥物研究的挑戰(zhàn)與展望
目前已有多個以BRD4為靶點的藥物進(jìn)入臨床試驗研究階段，但文獻(xiàn)和專利等公開報道的抑制劑結(jié)構(gòu)類型仍相對有限，小分子成藥性亟待提高。現(xiàn)有抑制劑主要通過與BRD4的溴結(jié)構(gòu)域競爭性結(jié)合發(fā)揮作用，但選擇性和藥代動力學(xué)特性仍需進(jìn)一步優(yōu)化。針對BRD4蛋白進(jìn)一步進(jìn)行新型抗腫瘤藥物研究具有極大的拓展空間。Bromodomain試劑盒作為研究BRD4與抑制劑相互作用的工具，在藥物發(fā)現(xiàn)和優(yōu)化過程中具有重要應(yīng)用價值。

基于Bromodomain檢測技術(shù)的BRD4靶向藥物研究進(jìn)展-南京優(yōu)愛(UA BIO), 重組蛋白專家