CRISPR/Cas9基因靶向修飾技術(shù)培訓(xùn)班邀請(qǐng)函

瀏覽次數(shù)：3685　發(fā)布日期：2016-9-12　來源：本站　本站原創(chuàng)，轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處

尊敬的：您好！

CRISPR/Cas9技術(shù)是近年來發(fā)展起來的可以對(duì)基因組完成精確修飾的一種技術(shù)，可完成基因定點(diǎn)InDel突變、敲入、多位點(diǎn)同時(shí)突變和小片段的刪失等。與傳統(tǒng)的TALEN和ZFN技術(shù)相比，CRISPR/Cas9系統(tǒng)更便捷、高效，應(yīng)用也更廣泛，目前該技術(shù)成功應(yīng)用于人類細(xì)胞、斑馬魚、小鼠以及細(xì)菌的基因組精確修飾。

為讓廣大從事醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)事業(yè)的人員更多的了解CRISPR/Cas9技術(shù)方法，更高質(zhì)量地完成科研任務(wù)，將于2016年10月15日至16日在北京舉辦CRISPR/Cas9基因靶向修飾技術(shù)培訓(xùn)班。每位學(xué)員均在教師的指導(dǎo)下，獨(dú)立完成一系列全部實(shí)驗(yàn)，參加學(xué)員均可免費(fèi)獲得一份CRISPR/Cas9質(zhì)粒。

一、課程安排

日期	時(shí)間	授課內(nèi)容	授課老師
10月14日	9:30-20:00	培訓(xùn)報(bào)到	劉剛博士 2008年博士畢業(yè)于中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院，從事腫瘤干細(xì)胞，細(xì)胞衰老，腫瘤轉(zhuǎn)移等細(xì)胞作用網(wǎng)絡(luò)和通路的研究，并作為骨干研究人員參加了973計(jì)劃項(xiàng)目、國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目、在香港中文大學(xué)做為作為Postdoc和Research fellow，從事研究工作。先后Nature Genetics，cell research、PLOS one等期刊發(fā)表論文十余篇。
10月15日	9:00-11:30	理論講解： 1.CRISPR/Cas9靶向基因改造技術(shù)簡(jiǎn)介（三大基因組編輯工具） 2.CRISPR/Cas9系統(tǒng)作用原理 3.guide RNA序列設(shè)計(jì)（特異性分析，效率驗(yàn)證，不同物種sgRNA設(shè)計(jì)）實(shí)驗(yàn)操作： 1.CRISPR/Cas9基因表達(dá)載體構(gòu)建 2.連接，轉(zhuǎn)化
10月15日	13:00-17:00	理論講解： 1.基因轉(zhuǎn)染技術(shù)（脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染，電轉(zhuǎn)，病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)，顯微注射等） 2.Crispr/Cas9轉(zhuǎn)染策略（植物，動(dòng)物，原核生物） 3.CRISPR/Cas9病毒系統(tǒng)選擇實(shí)驗(yàn)操作：CRISPR/Cas9轉(zhuǎn)染靶細(xì)胞
10月16日	9:00-11:30	理論講解： 1.基因敲除小鼠模型構(gòu)建策略 2.Crispr/Cas9與siRNA、shRNA 3.陽(yáng)性克隆篩選策略選擇實(shí)驗(yàn)操作： 1.CRISPR/Cas9轉(zhuǎn)然后基因組DNA提取 2.靶基因修飾位點(diǎn)PCR擴(kuò)增及鑒定（引物設(shè)計(jì)策略）
10月16日	13:00-17:00	理論講解： 1.多靶點(diǎn)sgRNA載體構(gòu)建策略 2.Crispr/Cas9系統(tǒng)應(yīng)用實(shí)例分析 1)哺乳動(dòng)物 2)植物 3)細(xì)菌，真菌實(shí)驗(yàn)操作： 1.SDS-PAGE膠制備，瓊脂糖凝膠電泳 2.T7E1法檢測(cè)Crispr/Cas9系統(tǒng)sgRNA效率。