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深藍(lán)云直播課堂:多重PCR實(shí)驗(yàn)的實(shí)際操作與運(yùn)用結(jié)合

瀏覽次數(shù):4081 發(fā)布日期:2021-5-8  來(lái)源:本站 本站原創(chuàng),轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處

PCR技術(shù)以特異性的寡核苷酸引物放大擴(kuò)增特定的DNA片段,一對(duì)引物在單次反應(yīng)擴(kuò)增單個(gè)基因。通常每個(gè)靶標(biāo)分別進(jìn)行檢測(cè),即單重PCR反應(yīng),但當(dāng)我們需要檢測(cè)多個(gè)靶標(biāo)基因時(shí),單重PCR費(fèi)時(shí)費(fèi)力同時(shí)無(wú)法排除不同樣品孔間的加樣差異,如內(nèi)參基因的歸一化檢測(cè),需要在同一反應(yīng)管中檢測(cè)內(nèi)參基因和目標(biāo)基因,多重PCR實(shí)驗(yàn)無(wú)疑是最簡(jiǎn)單直接的解決方案。
 

多重PCR也稱(chēng)復(fù)合PCR,是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上改進(jìn)并發(fā)展起來(lái)的一種PCR擴(kuò)增技術(shù),即可在一個(gè)反應(yīng)體系中加入兩對(duì)以上引物,同時(shí)擴(kuò)增出多個(gè)核酸片段。在熒光定量PCR(qPCR)和數(shù)字PCR(digital PCR)技術(shù)中,多重PCR設(shè)計(jì)配合多熒光通道可以進(jìn)行更多靶標(biāo)的相對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)品的檢測(cè)和直接的絕對(duì)定量檢測(cè),既具有單重PCR的敏感性和特異性,同時(shí)又比單重PCR更加高效、快捷和經(jīng)濟(jì)。

多重PCR實(shí)驗(yàn)具體如何進(jìn)行?又有哪些注意事項(xiàng)?實(shí)時(shí)熒光定量PCR和數(shù)字PCR如何和多重PCR結(jié)合?北京深藍(lán)云生物科技有限公司云課堂將為您答疑解惑。

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