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嘔吐毒素偶聯(lián)抗原(完全抗原)合成方法技術(shù)

瀏覽次數(shù):3194 發(fā)布日期:2014-4-8  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

         嘔吐毒素偶聯(lián)抗原(完全抗原)合成方法技術(shù)
   嘔吐毒素其產(chǎn)毒菌主要是鐮刀菌屬(Fusarium)的菌侏,其主要污染玉米、小麥、大米、大麥、小米和燕麥等谷物。嘔吐毒素具有雌激素作用,主要作用于生殖系統(tǒng),可使家畜,家禽等產(chǎn)生雌性激素亢進(jìn)癥。食用含嘔吐毒素的面粉制作的各種面食也可引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)的中毒癥狀,如惡心、發(fā)冷、頭痛、神智抑郁和共濟(jì)失調(diào)等。妊娠期的動物(包括人)食用含嘔吐毒素的食物可引起流產(chǎn)、死胎和畸胎,因此建立快速、靈敏、準(zhǔn)確的嘔吐毒素檢測技術(shù)對人類健康具有重要意義。
   目前,嘔吐毒素的檢測方法有液相色譜法,酶聯(lián)免疫法,免疫膠體金法,
(1)嘔吐毒素半抗原合成(合成技術(shù)路線見下圖)
 20-100mg嘔吐毒素,與1-3mol馬來酸酐,在2-5ml甲苯中,于80℃攪拌反應(yīng),8-20h后,蒸干溶劑,酸化,萃取,重結(jié)晶后得到嘔吐毒素半抗原。
(2)嘔吐毒素全抗原合成
將嘔吐毒素半抗原與牛血清白蛋白歐聯(lián)得到免疫原。
取60mg牛血清白蛋白溶于9.5ml PBS(0.01mol/L,pH5.0)溶液中,加入12.5mgEDC,加入1mlDMF溶解的10mg嘔吐毒素半抗原,室溫攪拌1h,再加6mg EDC,暗處攪拌反應(yīng)并過夜,用0.01mol/LPBS透析3天,每天換3次透析液,得到嘔吐毒素與牛血清白蛋白的免疫抗原。

發(fā)布者:山東藍(lán)都生物科技有限公司
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