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mosquito在解析新冠病毒復(fù)合物結(jié)構(gòu)的應(yīng)用

瀏覽次數(shù):2106 發(fā)布日期:2020-2-28  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
       2020年2月18日,清華大學(xué)生命學(xué)院王新泉課題組和醫(yī)學(xué)院張林琦課題組緊密合作,利用X射線(xiàn)衍射技術(shù),解析了新型冠狀病毒(2019-nCoV)表面刺突糖蛋白受體結(jié)合區(qū)(receptor-binding domain, RBD)與人受體ACE2蛋白復(fù)合物的晶體結(jié)構(gòu),準(zhǔn)確定位出新冠病毒RBD和受體ACE2的相互作用位點(diǎn),闡明了新冠病毒刺突糖蛋白介導(dǎo)細(xì)胞侵染的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)及分子機(jī)制,從而為治療性抗體藥物開(kāi)發(fā)以及疫苗的設(shè)計(jì)奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。(2019-nCoV RBD-ACE2復(fù)合物晶體結(jié)構(gòu)

     
 幾乎在同時(shí),西湖大學(xué)周強(qiáng)團(tuán)隊(duì)成功利用冷凍電鏡技術(shù)解析出此次新冠病毒的受體-ACE2的全長(zhǎng)結(jié)構(gòu)。這是世界上首次解析出ACE2全長(zhǎng)結(jié)構(gòu),和清華大學(xué)的研究結(jié)果相互補(bǔ)充和支持。(
ACE2-B0 AT1復(fù)合物結(jié)構(gòu)圖
 


 

X射線(xiàn)晶體衍射技術(shù):老而彌堅(jiān),風(fēng)采依舊

在冷凍電鏡技術(shù)問(wèn)世之前,一直以來(lái)研究大分子精細(xì)三維結(jié)構(gòu)的主要方法是X射線(xiàn)晶體衍射技術(shù),目前蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)中已測(cè)定的近14萬(wàn)個(gè)結(jié)構(gòu)中約90%是通過(guò)此方法獲得的。由此可見(jiàn),X射線(xiàn)晶體學(xué)在蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)解析中的重要地位。

 

傳統(tǒng)的X射線(xiàn)晶體學(xué)方法首先需要獲得生物大分子晶體,在合適的條件下生長(zhǎng)出一定尺寸和較好質(zhì)量的晶體。早期利用實(shí)驗(yàn)室X光源進(jìn)行生物大分子晶體結(jié)構(gòu)測(cè)定,通常需要百微米尺度的晶體才能獲得較高的分辨率。高亮度同步輻射光源及其相關(guān)光束線(xiàn)站技術(shù)的發(fā)展,使生物大分子晶體結(jié)構(gòu)測(cè)定的效率不斷提高,對(duì)生物大分子晶體本身的要求不斷降低,10μm甚至幾微米尺寸的晶體都可能獲得高分辨的結(jié)構(gòu)解析。


X射線(xiàn)晶體衍射的關(guān)鍵:成功的晶體生長(zhǎng)


上圖為為幾種典型的蛋白晶體實(shí)驗(yàn)結(jié)構(gòu)
 

mosquito, 來(lái)自英國(guó)SPT:蛋白結(jié)晶領(lǐng)域的明星產(chǎn)品


mosquito擁有以下幾個(gè)獨(dú)特的優(yōu)勢(shì):
 

1. 低至25 nL的量程,極大節(jié)省了珍貴的蛋白
 


2. 采用獨(dú)特的固相置換原理:
 

  •  沒(méi)有Air-gap和液體氣泡;  

  •  無(wú)需調(diào)整和定義移液參數(shù);

  • 不受液體粘稠度影響(PEG20000; 100%甘油;乙醇,去垢劑,膜蛋白和MPD等) 



固相置換針頭,無(wú)視液體粘度、無(wú)氣泡和空氣柱


3. 速度快,2分鐘完成Swissci板的點(diǎn)樣

 


 

4. 應(yīng)用范圍廣泛,勝任坐滴、懸滴、油滴、添加劑、微晶、Bicelle等多種應(yīng)用。
 

坐滴法 (sitting drop)

 

懸滴法 (hanging drop)

 

油滴法 (microbatch)

 

 添加劑法 (additive screening)


20 世紀(jì)后半葉發(fā)展最迅速的學(xué)科之一便是結(jié)構(gòu)生物學(xué),這是一門(mén)通過(guò)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)來(lái)詮釋蛋白質(zhì)功能的學(xué)科。蛋白質(zhì)是生命活動(dòng)主要的執(zhí)行者,只有形成了正確的結(jié)構(gòu),蛋白質(zhì)才能具有正確的功能。面對(duì)新冠疫情,在原子分辨率水平極其清晰地了解新冠病毒與受體復(fù)合物作用界面的信息,對(duì)于了解新冠病毒進(jìn)入細(xì)胞或者感染細(xì)胞的機(jī)制,以及新冠疫苗和治療性抗體藥研發(fā)具有重要的指導(dǎo)意義。

 

上海騰泉生物自2007年進(jìn)入中國(guó)以來(lái),一直致力于蓬勃發(fā)展的中國(guó)生命科學(xué)和醫(yī)藥研發(fā)事業(yè),尤其在蛋白結(jié)構(gòu)領(lǐng)域,其核心產(chǎn)品mosquito,dragonfly多年來(lái)一直是科學(xué)家身邊值得信賴(lài)的伙伴。2017年,騰泉引入美國(guó)品牌Jansi,以此提供優(yōu)秀的蛋白結(jié)晶紫外熒光成像設(shè)備,助力科學(xué)家們更快更有效率地找到合格的蛋白晶體。2019年,騰泉母公司SPT Labtech 不斷創(chuàng)新,關(guān)注冷凍電鏡中的核心難點(diǎn),樣本制備,新產(chǎn)品變色龍以獨(dú)有的blot free和全自動(dòng),以期幫助科學(xué)家更好地制備高質(zhì)量的Cryo-EM樣品。
 


騰泉生物提供完整的蛋白結(jié)晶學(xué)解決方案

 

發(fā)布者:SPT Labtech
聯(lián)系電話(huà):400-151-8616
E-mail:marketing@sptlabtech.cn

標(biāo)簽: 蛋白結(jié)晶
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