蛋白標簽的分類、特性、適用實驗及選擇標簽的注意事項介紹
蛋白標簽（protein tag）是指利用DNA體外重組技術，與目的蛋白一起融合表達的一種多肽或者蛋白，以便于目的蛋白的表達、檢測、示蹤和純化等。應用場景主要用于蛋白質檢測如：WB、ELISA、IP等。
根據(jù)不同的“穿搭風格”又分為：親和標簽，表位標簽，熒光標簽。
親和標簽類
親和標簽指在重組蛋白的N端或C端添加的一段短肽，通常包含幾個到幾百個氨基酸，主要用于蛋白質的純化或提高其溶解度，包括：His、GST、MBP、Strep-tag II、SUMO、Halo等。
寶貝名稱：His
寶貝詳情：0.84kDa（大�。�；His-His-His-His-His-His（標簽序列）；尺寸最小，通用性強，對蛋白影響小，能與多種金屬離子發(fā)生特殊的相互作用（優(yōu)點）；特異性低，純化純度低（缺點）；蛋白純化（應用）
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寶貝名稱：GST
寶貝詳情：26kDa（大�。�；211種氨基酸（序列）；可增強蛋白可溶性，減少蛋白降解，促進表達（優(yōu)點）；蛋白較大可能影響目標蛋白功能（缺點）；蛋白融合表達和純化，pull-down檢測（應用）
寶貝名稱：MBP
寶貝詳情：40kDa（大�。�；大腸桿菌K12的malE基因編碼，包含369個氨基酸（序列）；增加目標蛋白的溶解度和表達水平（優(yōu)點）；標簽非常大對目標蛋白干擾較強，功能研究需通過酶切去除（缺點）；表達易形成包涵體的蛋白（應用）
寶貝名稱：Strep-tag II
寶貝詳情：1.06kDa（大�。籛SHPQFEK（序列）；特異性強、洗脫條件溫和、蛋白活性保持良好，適合對蛋白結構和功能有高要求的實驗（優(yōu)點）；成本高（缺點）；純化目標蛋白表達量低或背景復雜的體系（應用）
寶貝名稱：SUMO
寶貝詳情：11.2kDa（大�。�；97個氨基酸（序列）；顯著提高融合蛋白的可溶性和穩(wěn)定性增強表達（優(yōu)點）；親和純化時要與其它標簽聯(lián)用（缺點）；親和層析純化，提高蛋白產量（應用）
寶貝名稱：Halo
寶貝詳情：33kDa；395個氨基酸（序列）；可以與多種熒光配基或生物素快速形成穩(wěn)定的共價結合，熒光強度強，特異性高（優(yōu)點）；標簽較大（缺點）；檢測和親和結合或固相化固定目的蛋白（應用）
表位標簽類
表位標簽往往是短肽序列，可以通過特定的抗體與表位結合，實現(xiàn)對目標蛋白質的精準定位和檢測。它們在免疫沉淀、WB、免疫熒光和染色質免疫沉淀等應用中發(fā)揮著重要作用。最常用的表位標簽有Flag、HA、Myc、V5等。
寶貝名稱：Flag
寶貝詳情：1.01kDa（大�。�；DYKDDDDK（序列）；具有很強的親和力和特異性，可用于快速、高效地檢測和純化目標蛋白（優(yōu)點）；需要高成本的抗Flag親和柱（缺點）；高純度純化和免疫沉淀（應用）
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寶貝名稱：HA
寶貝詳情：1.1kDa（大小）；YPYDVPDYA（序列）；對外源靶蛋白的空間結構影響小，抗體普及特異性高（優(yōu)點）；純化應用較少（缺點）；Western blot、免疫沉淀、免疫熒光和細胞內蛋白表達檢測（應用）
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寶貝名稱：c-Myc
寶貝詳情：1.2kDa（大�。籈QKLISEEDL（序列）；高特異性的抗Myc單克隆抗體，分子量小（優(yōu)點）；需低pH洗脫，影響蛋白活性（缺點）；Western blot、免疫沉淀、免疫熒光和細胞內蛋白表達檢測（應用）
寶貝名稱：V5
寶貝詳情：1kDa（大�。�；GKPIPNPLLGLDST （序列）；抗體特異性好，分子量小（優(yōu)點）；應用范圍小于HA和myc（缺點）；Western blot、免疫沉淀、免疫熒光（應用）
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熒光標簽類
熒光標簽可用于活細胞和死細胞檢測，最常用的熒光蛋白包括綠色熒光蛋白、橙色熒光蛋白、紅色熒光蛋白和黃色熒光蛋白。它們被廣泛用于影像學研究，如細胞定位和共表達實驗。
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參考往期推文鏈接：
一文揭秘！綠色熒光蛋白的前世今生
超詳細！熒光蛋白大盤點
基因組標簽計劃
中國科學院分子細胞科學卓越創(chuàng)新中心基因組標簽計劃（GTP）研發(fā)中心通過單倍體干細胞介導的半克隆技術獲得了數(shù)百種標簽小鼠模型。通過為所感興趣的蛋白賦予標簽進而通過識別標簽研究蛋白質的行為，研究者們可以高效便捷的確定蛋白質的表達位置和功能互作，追蹤和分析蛋白質在小鼠機體內的動態(tài)行為。
GTP標簽小鼠模型可在蛋白質互作，定位等基因功能研究和生物醫(yī)藥研發(fā)中發(fā)揮重要作用。標簽小鼠品系為中國科學院分子細胞科學卓越創(chuàng)新中心所有，南模生物代為分發(fā)。
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文末溫馨小提示：任何一個融合標簽都不是萬能的，沒有哪一個標簽適合所有蛋白的表達，選擇標簽必須考慮蛋白的性質和實驗需求。了解融合標簽的特性，選擇合適的標簽，才能讓重組蛋白表達事半功倍。
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