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酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)(ELISpot) 的原理及應(yīng)用

瀏覽次數(shù):399 發(fā)布日期:2026-2-5  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

生物醫(yī)學(xué)不斷突破,精準(zhǔn)解析、量化免疫系統(tǒng)功能的重要性日益凸顯。作為免疫檢測領(lǐng)域的高效利器,酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)(ELISpot)成為解鎖免疫奧秘的關(guān)鍵手段 —— 它能精準(zhǔn)捕捉單個免疫細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子等分子,為免疫應(yīng)答研究打開全新思路。

小備帶你走進(jìn) ELISpot 的世界,一同揭開免疫反應(yīng)背后的神秘面紗!

一、ELISpot技術(shù)介紹
酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)(Enzyme Linked ImmunoSpot Assay,ELISpot)是在ELISA 基礎(chǔ)上迭代創(chuàng)新的單細(xì)胞功能檢測技術(shù)。其技術(shù)溯源至 1978 年,牛津大學(xué) Don Mason 教授率先建立 “膠片斑點(diǎn)技術(shù)”,實(shí)現(xiàn)抗體分泌細(xì)胞的初步檢測;1983 年,J.D. Sedgwick 與 C. Czerkinsky 分別獨(dú)立完成技術(shù)升級,引入酶聯(lián)免疫反應(yīng)體系,顯著提升檢測實(shí)用性與靈敏度。

ELISpot 可單細(xì)胞水平定量分析細(xì)胞因子 / 抗體分泌水平,實(shí)現(xiàn)對樣本活細(xì)胞免疫狀態(tài)的動態(tài)監(jiān)測與功能評估。檢測原理如圖所示:細(xì)胞接種于包被特異性捕獲抗體的 PVDF 微孔板,分泌的靶標(biāo)蛋白被原位捕獲;去除細(xì)胞后加入生物素標(biāo)記二抗,經(jīng)酶促顯色反應(yīng)形成可見顯色斑點(diǎn)(Spot)。
 
該技術(shù)兼具高靈敏度、高通量、活細(xì)胞功能解析、操作便捷等核心優(yōu)勢,已廣泛應(yīng)用于疫苗研發(fā)、藥物篩選、感染性疾病診療 [5]、腫瘤免疫 [6]、自身免疫病、變態(tài)反應(yīng)及移植排斥預(yù)警等免疫相關(guān)研究領(lǐng)域。
 
ELISpot原理圖(圖源網(wǎng)絡(luò),侵刪)
   
二、ELISpot與ELISA對比
從技術(shù)核心原理來看,ELISpot 與 ELISA 均依托雙抗體夾心法建立檢測體系,但二者檢測維度存在本質(zhì)差異:ELISA 旨在對樣本溶液中游離靶標(biāo)蛋白進(jìn)行總量定量分析,而 ELISpot 則聚焦于活細(xì)胞層面,實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞免疫功能狀態(tài)的動態(tài)監(jiān)測與功能評估,具體對比如下。
 
以上是ELISpot 憑借原理優(yōu)勢與性能特點(diǎn),在疫苗研發(fā)、腫瘤免疫治療等領(lǐng)域展現(xiàn)出廣闊應(yīng)用前景與巨大研究價值。伴隨生物技術(shù)的持續(xù)迭代與突破,ELISpot 技術(shù)將進(jìn)一步拓展應(yīng)用邊界,為人類健康事業(yè)發(fā)展提供關(guān)鍵技術(shù)支撐。
  
三、Elispot酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)檢測服務(wù)哪里有?
樂備實(shí)LabEx提供Elispot酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)檢測服務(wù):
 
貨號 產(chǎn)品名
LXEMS01-1 小鼠IFN-γ單色Elispot(酶標(biāo))Panel檢測服務(wù)
LXEHS01-1 人IFN-γ單色Elispot(酶標(biāo))Panel檢測服務(wù)
LXEHS02-1 人IL-2單色Elispot(酶標(biāo))Panel檢測服務(wù)

樂備實(shí)(上海優(yōu)寧維生物科技股份有限公司旗下全資子公司),是國內(nèi)專注于提供高質(zhì)量蛋白檢測以及組學(xué)分析服務(wù)的實(shí)驗服務(wù)專家,自2018年成立以來,樂備實(shí)不斷尋求突破,公司的服務(wù)技術(shù)平臺已擴(kuò)展到單細(xì)胞測序、空間多組學(xué)、流式檢測、超敏電化學(xué)發(fā)光、Luminex多因子檢測、抗體芯片、PCR Array、ELISA、Elispot、PLA蛋白互作、多色免疫組化、DSP空間多組學(xué)等30多個,建立起了一套涵蓋基因、蛋白、細(xì)胞以及組織水平實(shí)驗的完整檢測體系。
 
原文點(diǎn)擊:窺見免疫應(yīng)答:ELISpot 技術(shù)原理及應(yīng)用全解
發(fā)布者:上海優(yōu)寧維生物科技股份有限公司
聯(lián)系電話:15921930842
E-mail:yh-wang@univ-bio.com

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