一、TSLP蛋白的分子特征與生物學(xué)功能
TSLP是一種細(xì)胞因子家族的蛋白質(zhì)，通常在肺、皮膚和腸道屏障表面的上皮細(xì)胞中表達(dá)。TSLP主要由非造血細(xì)胞產(chǎn)生，如成纖維細(xì)胞、上皮細(xì)胞和不同類型的基質(zhì)或基質(zhì)樣細(xì)胞。研究表明TSLP參與啟動(dòng)導(dǎo)致哮喘和其他過(guò)敏性疾病發(fā)展的炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)。TSLP與TSLPR和IL-7Rα鏈形成三元信號(hào)復(fù)合物，通過(guò)激活STATs和JAK2途徑啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)。TSLP受體屬于造血因子受體家族成員，為I型細(xì)胞因子受體蛋白，只有與IL-7受體α鏈共同作用時(shí)才可形成高親和力的受體復(fù)合物。TR-FRET TSLP/TSLPR試劑盒可用于定量檢測(cè)TSLP與TSLPR的結(jié)合活性，為研究該信號(hào)通路提供技術(shù)工具。

二、TSLP信號(hào)通路的激活機(jī)制
當(dāng)TSLP與TSLPR結(jié)合后，二聚體增強(qiáng)IL-7Rα的募集，形成細(xì)胞外三元復(fù)合物，JAK2被激活。JAK2進(jìn)一步介導(dǎo)STATs的磷酸化，使STATs轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞核內(nèi)，激活下游基因轉(zhuǎn)錄�；�于這一信號(hào)通路構(gòu)建的報(bào)告基因細(xì)胞系可用于TSLP相關(guān)藥物的體外效果評(píng)價(jià)，熒光素酶讀值代表信號(hào)通路的激活效果。研究發(fā)現(xiàn)，糖皮質(zhì)激素可降低哮喘模型中TSLP和TSLPR的表達(dá)，改變TSLP誘導(dǎo)的DC功能，使抗原誘導(dǎo)的Th2反應(yīng)朝Th1反應(yīng)偏移，IL-4、IL-5、IL-13減少，IL-10和IFN-γ增加，此作用依賴于DC中OX40L的下調(diào)以及IL-12產(chǎn)量增加。TR-FRET技術(shù)可應(yīng)用于研究TSLP與TSLPR結(jié)合后的構(gòu)象變化，評(píng)估不同條件下受體配體相互作用的動(dòng)態(tài)變化。

三、TSLP在哮喘發(fā)病機(jī)制中的作用
哮喘患者的研究數(shù)據(jù)表明，哮喘氣道炎癥的嚴(yán)重程度與TSLP的表達(dá)水平呈正相關(guān)。TSLP-TSLPR及下游信號(hào)分子對(duì)過(guò)敏性炎癥疾病如過(guò)敏性哮喘的發(fā)生及發(fā)展過(guò)程具有重要作用。TSLP的作用機(jī)制包括：作用于骨髓源性樹突狀細(xì)胞、肥大細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞和T細(xì)胞介導(dǎo)的天然免疫；在小鼠哮喘模型中，TSLP可以有效激活自然殺傷T細(xì)胞，從而產(chǎn)生IL-13；TSLP可有效激活肥大細(xì)胞，產(chǎn)生IL-5、IL-8、IL-1和TNF，通過(guò)IL-5和嗜酸性粒細(xì)胞活化趨化因子-2募集嗜酸性粒細(xì)胞，通過(guò)IL-8募集中性白細(xì)胞，加重氣道炎癥的發(fā)生發(fā)展。TR-FRET TSLP/TSLPR試劑盒可用于篩選能夠阻斷TSLP與TSLPR結(jié)合的分子，評(píng)估其免疫調(diào)節(jié)活性。

四、TSLP單抗藥物的研發(fā)進(jìn)展
在全球范圍內(nèi)，TSLP單抗藥物研發(fā)進(jìn)度領(lǐng)先的藥物已于2021年12月在美國(guó)獲批上市，成為第一個(gè)在廣泛嚴(yán)重哮喘患者群體中能夠持續(xù)顯著減少病情加重的生物制劑。該藥物通過(guò)阻斷TSLP與受體的結(jié)合，抑制下游炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)。在國(guó)內(nèi)，多家藥企的TSLP單抗已進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段。TR-FRET技術(shù)可應(yīng)用于評(píng)估不同單抗對(duì)TSLP與TSLPR結(jié)合的阻斷效果，為藥物篩選和優(yōu)化提供定量檢測(cè)方法。

五、TSLP信號(hào)通路的臨床研究意義
TSLP作為一種新型細(xì)胞因子，在哮喘等過(guò)敏性疾病的發(fā)病機(jī)制中處于上游調(diào)控地位。靶向TSLP的治療策略與靶向下游炎癥因子如IL-4、IL-5和IL-13的策略相比，具有更廣泛的抗炎效果。TSLP單抗可同時(shí)抑制多種Th2細(xì)胞因子的產(chǎn)生，適用于更廣泛的哮喘患者群體，包括非嗜酸性粒細(xì)胞性哮喘患者。TR-FRET TSLP/TSLPR試劑盒可用于評(píng)估患者樣本中TSLP與受體的結(jié)合活性，為疾病分型提供分子水平依據(jù)。

六、研究展望
TSLP/TSLPR信號(hào)通路在過(guò)敏性炎癥疾病的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮核心作用。TR-FRET TSLP/TSLPR試劑盒為研究該信號(hào)通路提供了靈敏、高效的檢測(cè)工具，可應(yīng)用于分子機(jī)制研究、藥物篩選和臨床監(jiān)測(cè)。未來(lái)研究將進(jìn)一步闡明TSLP在不同過(guò)敏性疾病中的作用機(jī)制，探索TSLP單抗在慢性鼻竇炎、特應(yīng)性皮炎等其他過(guò)敏性疾病中的應(yīng)用潛力，以及開發(fā)具有更高選擇性的TSLP抑制劑。隨著對(duì)TSLP信號(hào)網(wǎng)絡(luò)調(diào)控機(jī)制認(rèn)識(shí)的不斷深入，其在過(guò)敏性疾病治療中的應(yīng)用價(jià)值將持續(xù)拓展。

基于TR-FRET技術(shù)的TSLP/TSLPR信號(hào)通路在哮喘治療中的研究進(jìn)展-南京優(yōu)愛(ài)(UA BIO), 重組蛋白專家