在分子生物學與基因研究的浪潮中，RNA 干擾（RNAi）技術(shù)憑借其精準的基因調(diào)控能力，成為科研領(lǐng)域的重要工具，而siRNA（小干擾 RNA） 作為 RNAi 通路的核心執(zhí)行者，更是憑借高特異性、高效性的優(yōu)勢，成為基因功能研究、靶點驗證的 “利器”。

什么是 siRNA？進化保守的基因沉默衛(wèi)士
siRNA是一種小的雙鏈RNA分子（~21-25 nt），由Dicer酶（RNAaseⅢ家族中對雙鏈RNA具有特異性的酶）加工而成。它的核心功能是參與生物體內(nèi)RNA干擾保守機制，序列特異性地介導基因沉默。 一個成熟的siRNA具有非常明確的結(jié)構(gòu)特征：每條鏈的5'末端有一個磷酸基團，3'末端有一個羥基。此外，每條鏈的3'端通常有兩個突出的核苷酸，這種結(jié)構(gòu)是它發(fā)揮功能的基礎(chǔ)。

siRNA的結(jié)構(gòu)示意圖

siRNA 作用機制：四步實現(xiàn)精準基因 “敲低”

維真生物擁有多年KO細胞系建立的經(jīng)驗，包括但不限于HEK293、HepG2、N2A、A549、PC12等細胞系，經(jīng)驗豐富，服務有保證。具體服務內(nèi)容見下面：

① 形成與加載：當合成的siRNA進入細胞質(zhì)后，會被一個稱為“RNA誘導的沉默復合體（RISC）”的多蛋白復合物識別和結(jié)合。

② 鏈的選擇與激活：RISC復合物會解開siRNA的雙鏈，并降解其中一條被稱為“過客鏈”（或正義鏈）的RNA鏈。剩下的那條鏈被稱為“引導鏈”（或反義鏈），它被保留在RISC復合物中，形成活化的RISC。

注：決定哪條鏈是引導鏈主要看5' 端堿基配對的相對熱力學穩(wěn)定性，其中配對不太穩(wěn)定的鏈被認定為引導鏈。

③ 靶標識別與切割：活化的RISC利用其攜帶的引導鏈，在細胞內(nèi)“掃描”與之序列完全互補的mRNA。一旦找到完美的匹配，RISC復合物中的核心蛋白——Argonaute 2（AGO2）——就會像一個“分子剪刀”一樣，在引導鏈的指導下精確地切割目標mRNA。

④ 翻譯的終止：被切割的mRNA失去了完整性，會迅速被細胞內(nèi)的其他酶進一步降解。mRNA的降解直接導致無法翻譯出對應的蛋白質(zhì)，從而實現(xiàn)了對該基因表達的“沉默”或“敲低”。 值得注意的是，一個活化的RISC復合物可以循環(huán)使用，連續(xù)切割多個目標mRNA分子，這使得siRNA的基因沉默效果非常高效。

siRNA介導的RNA干擾通路

siRNA 四大核心特點，適配多場景科研需求：

1)高特異性：僅沉默序列完全互補的靶基因，理論上可靶向任意基因。

2)高效性：低濃度即可顯著抑制基因表達（沉默效率常 > 90%）。

3)普適性：在動植物、真菌、哺乳動物中保守存在。

4)瞬時性：不整合基因組，效應隨細胞分裂稀釋，適合短期研究。

化學合成 siRNA，科研篩選的優(yōu)選方案

人工化學合成的 siRNA，在保留 siRNA 核心功能的基礎(chǔ)上，還兼具諸多實驗優(yōu)勢，成為科研人員開展基因靶位點篩選的優(yōu)選：操作簡便易上手，無需復雜的載體構(gòu)建；轉(zhuǎn)染效率高，能快速進入細胞發(fā)揮作用；對細胞或組織的毒副作用小，最大程度保證實驗樣本的完整性；還可實現(xiàn)大規(guī)模制備，滿足高通量篩選、重復實驗等多種實驗需求，尤其適合基因靶位點尚未確定時，開展 siRNA 有效片段的篩選工作。

維真生物深耕生物科研試劑領(lǐng)域，打造高品質(zhì)化學合成siRNA產(chǎn)品，嚴循 siRNA 結(jié)構(gòu)特征與設(shè)計原則，精準設(shè)計序列，保證產(chǎn)品的高特異性與高效沉默效率。